小麥種質貴農775抗條銹病基因標記的相關片段克隆及熒光原位雜交.pdf

1、小麥抗病種質貴農775是原貴州大學張慶勤教授利用遠緣雜交育成的著名抗源材料，在抗病育種和生產上具有重要的應用價值。本研究利用分子標記和熒光原位雜交技術對其進行了研究，研究取得的主要結果如下： 1.將貴農775中與YrGA連鎖的標記片段克隆并轉為更穩(wěn)定的SCAR標記，用SCAR標記同時驗證條中32號小種接種鑒定的西農97148×貴農775雜交種F2代的群體，根據驗證結果統(tǒng)計分析表明YrGA基因的遺傳符合3R∶1S。估算這2個標記位

2、點與相應的抗條銹病基因各自的遺傳距離；RAPD引物S2018標記位點與抗條銹病基因YrGA之間的遺傳距離為： 2.378±0.0064cM；SCAR引物SCARs2018RL-140標記位點與抗條銹病基因YrGA之間的遺傳距離為：0.355±0.001cM；同時用SCARs2018R與SCARS2018L引物組合和Pm21C與Pm21D引物組合檢測貴農775、簇毛麥和揚麥5號，結果表明Pm21C與Pm21D引物組合不能在貴農77

3、5中擴增出1.4kb特異帶，而SCARs2018R與SCARS2018L引物組合同時能在貴農775、簇毛麥和揚麥5號中擴增出140bp的特異帶；證明貴農775簇毛麥易位系不同于劉大鈞等的研究結果。 2.用熒光原位雜交技術鑒定貴農775為簇毛麥的新的易位系，用特異引物S2018擴增探針作雜交進一步證明了與YrGA基因的連鎖標記也是來自簇毛麥。在用熒光原位雜交時，針對性優(yōu)化了熒光原位雜交過程中的一些參數，染色體制片中用了α-溴萘，2