CTB-HRP在探討穴位及穴位與臟腑相關(guān)神經(jīng)屬性中的應(yīng)用.pdf

1、目的:用霍亂毒素亞單位B結(jié)合熒光素488和594(Cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488, 594, CTB-Alexa488, 594)示蹤技術(shù)揭示大鼠穴位及穴位與臟腑相關(guān)神經(jīng)屬性的特異性聯(lián)系,從形態(tài)學(xué)角度揭示單穴位、穴位與穴位、穴位與臟腑三個(gè)層次的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及聯(lián)系。
　　方法:將成年(SD)大鼠(雄性)18只,體重200-280g,飼養(yǎng)于12h光照/12h黑

2、暗的環(huán)境中,自由飲水和攝食。微量注射,熒光示蹤劑(CTB-Alexa488或CTB-Alexa594),分3種類型操作實(shí)驗(yàn)(一)單穴位注射(二)雙穴位注射(三)單穴位與相關(guān)臟腑注射。待72小時(shí)后灌流固定取材(背根結(jié)、脊髓、腦)、觀察。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)證實(shí)穴位在脊髓等神經(jīng)系統(tǒng)的節(jié)段行、區(qū)域性分布特點(diǎn),穴位的神經(jīng)屬性特點(diǎn)明確。單標(biāo)法所示在腰神經(jīng)節(jié)內(nèi)的46個(gè)神經(jīng)元中主要集中在L5/L4,腰髓前角內(nèi)發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)元主要集中在L5;雙標(biāo)法所示在

3、脊神經(jīng)節(jié)內(nèi)的330個(gè)神經(jīng)元中雙標(biāo)的主要集中在C7/C6,頸髓前角內(nèi)發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)元中雙標(biāo)的神經(jīng)元主要集中在C8;穴位與內(nèi)臟標(biāo)記法所示在背根節(jié)內(nèi)僅有單一標(biāo)記的神經(jīng)元,尚未發(fā)現(xiàn)被雙標(biāo)記的神經(jīng)元,脊髓內(nèi)也僅有單一標(biāo)記的神經(jīng)元,尚未發(fā)現(xiàn)。同時(shí)證實(shí)該熒光示蹤技術(shù)擁有簡(jiǎn)單易行、周期短,實(shí)驗(yàn)操作步驟簡(jiǎn)短等特點(diǎn)。
　　結(jié)論:體表穴位的神經(jīng)節(jié)段性與區(qū)域性特性以及穴位治療作用與神經(jīng)系統(tǒng)存在聯(lián)系;而雙穴標(biāo)記證實(shí)雙穴位不僅存在節(jié)段性和區(qū)域性特點(diǎn)而且證實(shí)穴位與