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文檔簡介
1、目的:1.在敘利亞金黃地鼠(Syrian hamster)頰囊粘膜上建立口腔潰瘍動物模型.2.運用脂氧素A<,4>(lipoxinA<,4>,LXA<,4>)和PDl46176(selective15-lipoxygenase inhibitor,PDl46176)干預口腔潰瘍,探討LXA<,4>.對敘利亞金黃地鼠口腔潰瘍的發(fā)病和愈合的作用.3.研究脂氧素A<,4>與口腔潰瘍發(fā)病的相關(guān)機制. 方法:1.實驗動物:清潔級雄性敘利亞
2、金黃地鼠,7~8周齡,體重(body weight,Bw)70~120g,51只,分為對照組、PDl46176處理組、LXA<,4>處理組,每組分三批.對照組分為第4天、8天、14天三批,第一批4只,第二批5只,第三批6只;PDl46176處理組和LXA<,4>處理組按同樣標準分三批,每批分別為6只. 2.動物實驗:利用2.5﹪的醋酸0.2ml.粘膜下注射建立敘利亞金黃地鼠口腔瘍模型.(1)對照組建模前三天,羧甲基纖維素鈉(So
3、diumcarboxymethycellulose,CMC-Na)糊劑每100g體重1ml灌胃,每日一次(Once daily,q.d.);局部粘膜注射PBS液50 μl后立即造模,以后PBS繼續(xù)每日一次.造模后繼續(xù)羧甲基纖維素鈉糊劑灌胃,第三批給予同樣處理至造模后第7天.(2)PDl46176組給予PDl46176混懸液按每100g體重1ml灌胃,每日一次,三天后建模;局部粘膜注射PBS液50μl后立即造模,以后PBS液繼續(xù)每日一次.
4、造模后繼續(xù)PD146176混懸液灌胃,第三批給予同樣處理至造模后第7天.(3)LXA<,4>處理組造模前三天的處理同對照組,造模前30min給予LXA<,4> I液0.5 μg/100g腹腔注射,局部注射LXA<,4> Ⅱ液50μl立即建模.造模后繼局部注射LXA<,4> Ⅱ液50 μl,每日一次.其余處理同對照組. 3.實驗指標:觀察地鼠全身狀況,監(jiān)測體重.肉眼觀察潰瘍出現(xiàn)的時間,愈合時期、地鼠頰囊粘膜面的損害情況和頰面部損傷
5、程度.光鏡觀察粘膜組織病理變化.比色法測定地鼠血清與粘膜組織中髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性.ELISA法檢測地鼠血清和粘膜組織中的LXA4的含量.結(jié)果1.各組地鼠全身狀態(tài)比較結(jié)果各組體重與造模前比較均下降,PD146176處理組與對照組、LXA<,4>處理組比較均有顯著差異(P<0.05),而LXA<,4>處理組比對照組無顯著性差異(P>0.05).另外對照組和LXA<,4>處理組的第一批與第二批均無死亡,
6、第三批死亡率分別為33.33﹪、16.67﹪;PD146176處理組中各批均有死亡,第一批與第二批的死亡率分別為16.67﹪、33.33﹪,第三批死亡率達50﹪. 2.病灶肉眼觀察 結(jié)果:(1)各組的右側(cè)頰囊均在造模后4天內(nèi)出現(xiàn)典型潰瘍,但潰瘍面積大小及合并其它部位損傷程度不同.觀察日內(nèi)bXA<,4>處理組愈合時期比對照組提前,而PD146176處理組未見潰瘍愈合. (2)地鼠右頰粘膜評分結(jié)果:LXA<,4>處理
7、組評分均明顯低于對照組、PD146176處理(P<0.05),而PD146176處理與對照組比較差異無顯著性(P>0.05). (3)三組動物頰面部的損害程度均不同(P<0.05);LXA<,4>處理組的損害程度明顯低于對照組(P<0.05),PD146176處理組則明顯高于對照組(P<0.05). 3.組織病理學分期評分顯示對照組和LXA<,4>處理組的第一、二、三批呈現(xiàn)口腔粘膜潰瘍典型的發(fā)病愈合過程.PD146176
8、處理組潰瘍在觀察日結(jié)束時仍未修復成正常上皮;而LXA<,4>處理組的全部和對照組的大部分樣本已修復成正常上皮.三組兩兩比較,PD146176處理組較LXA<,4>處理組差異有顯著性(P<0.05).LXA<,4>處理組的第一批的評分均值與對照組比較差異有顯著性(P<0.05),而PD146176處理組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05). 4.各組地鼠血清中髓過氧化物酶(MPO)含量比較:各組MPO的量在第4天、第8天
9、時兩兩比較差異均有顯著性(P<0.05),PD146176處理組MPO的量均高于對照組和LXA<,4>處理組,LXA<,4>處理組MPO的量均低于其它兩組.在第8天對照組與PD146176處理組的MPO量無差異,而LXA<,4>處理組MPO的量仍低于對照組和PD1461.76處理組(P<0.05). 5.各組地鼠不同時期右頰粘膜MPO含量比較:LXA<,4>處理組右頰粘膜組織中MPO的量在第4天、第8天均低于對照組(P<0.05
10、)和PD146176處理組(P<0.05).在第8天、第14天,PD146176處理組與對照組比較差異均有顯著性(P<0.05),MPO的量高于對照組. 6.地鼠血清中的LxA<,4>的含量:在第4天、第8天PD14676處理組血清LXA<,4>的濃度明顯低于對照組(P<0.01),第14天兩組lXA<,4>的濃度相比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01). 7.地鼠粘膜組織中的lXA<,4>的含量:PD146176處理組與
11、對照組比較在第4天和第8天差異均有顯著性(P<0.05),LXA4在PD2146176處理組右頰粘膜組織中的含量低于對照組.在第14天兩組比較差異無顯著性(P>0.05). 結(jié)論:1.利用醋酸溶液成功建立敘利亞金黃地鼠口腔潰瘍模型. 2.運用LXA4和PD146176干預口腔潰瘍,發(fā)現(xiàn)LxA<,4>對敘利亞金黃地鼠的口腔潰瘍發(fā)病和愈合均有影響. 3.提示LXA4與口腔潰瘍發(fā)病及愈合可能相關(guān),其機制可能是通過調(diào)節(jié)生
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