
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文檔簡介
1、目的:探討凍融后移植的小鼠卵巢組織對促性腺激素的反應(yīng)。 方法:將36只性成熟雌性小白鼠用隨機數(shù)字表法分為卵巢組織新鮮移植組、凍融移植組和對照組,每組12只。新鮮移植組小鼠切除雙側(cè)卵巢,將卵巢切成小組織塊,每側(cè)卵巢平均切成3塊,每塊的體積約為1mm×2mm×2mm大小,卵巢組織用生理鹽水沖洗干凈后立即移植入小鼠雙側(cè)腎被膜下,每側(cè)腎臟植入3塊;凍融移植組小鼠切除雙側(cè)卵巢,將每側(cè)卵巢平均切成3塊,生理鹽水沖洗干凈后采用玻璃化冷凍方法冷
2、凍保存,2周后將冷凍卵巢組織復(fù)蘇,移植入小鼠雙側(cè)腎被膜下。卵巢組織移植2周后新鮮移植組和凍融移植組,每組用隨機數(shù)字表法取6只小鼠應(yīng)用7.5IU人絕經(jīng)期促性腺激素及10IU人絨毛膜促性腺激素。通過動物術(shù)后陰道脫落細胞學(xué)檢查、移植卵巢組織光鏡觀察,比較卵泡形態(tài),計數(shù)各級卵泡數(shù)目,反映種植后卵巢組織存活、卵泡生長發(fā)育及對促性腺激素的反應(yīng)等情況。同時應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法觀察各組卵泡中卵泡刺激素受體的表達情況,高倍鏡下新鮮移植組、凍融移植組和
3、對照組各組分別隨機取20個竇狀卵泡和20個竇前卵泡,顯微攝像頭在相同條件下采集圖像,采用Image-Pro Plus5.0圖像分析軟件進行圖像分析,得到積分吸光度值來反映每組卵泡中卵泡刺激素受體的表達情況。 結(jié)果:新鮮移植組、凍融移植組和對照組未應(yīng)用促性腺激素小鼠卵巢組織內(nèi)近成熟卵泡百分率分別為2.3%、2.3%和2.6%,應(yīng)用促性腺激素小鼠卵巢組織內(nèi)近成熟卵泡百分率分別為4.2%、4.0%和5.8%,各組內(nèi)分別比較,差異均有統(tǒng)
4、計學(xué)意義(P<0.05);新鮮移植組和凍融移植組與對照組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。新鮮移植組、凍融移植組和對照組卵泡刺激素受體表達積分吸光度值在竇狀卵泡中分別為9408±2777、9175±3093和8838±2064,在竇前卵泡中分別為4531±1903、4809±1386和5516±1136,各組間分別比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論:1.卵巢組織冷凍保存、復(fù)蘇及移植過程未影響卵巢卵泡刺激素受
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