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文檔簡介
1、樹突棘是存在于神經(jīng)元樹突上的小突起,它以不足0.01-0.8立方微米的總體積,容納了成熟腦組織中90%興奮性突觸,其高度的形態(tài)多樣性被認(rèn)為是突觸可塑性的形態(tài)基礎(chǔ)。樹突棘素(spinophilin)和δ連環(huán)素(δ-catenin)是存在于樹突棘上重要蛋白質(zhì),二者均與肌動(dòng)蛋白共存于突觸后膜致密區(qū)。 Spinophilin常與蛋白磷酸酶結(jié)合,錨定到突觸后膜致密區(qū),并與肌動(dòng)蛋白結(jié)合共存于突觸后膜。它能與蛋白磷酸酶Ⅰ(PP1)的催化亞單位
2、結(jié)合并調(diào)節(jié)PP1的酶活性。在其氨基末端有一個(gè)肌動(dòng)蛋白結(jié)合域,在肌動(dòng)蛋白結(jié)合域中,有一些磷酸化位點(diǎn),能被蛋白激酶A(PKA),蛋白激酶C(PKC)和鈣離子/鈣調(diào)蛋白依賴的蛋白激酶(Ca2+/calmodulin-dependentproteinkinases)磷酸化。樹突棘素磷酸化后,即與肌動(dòng)蛋白分離,并從突觸后膜上脫離,使樹突棘失去形態(tài)的穩(wěn)定性,從而導(dǎo)致樹突棘結(jié)構(gòu)的丟失。Spinophilin還含有和PSD95/DLGy/zo-1(PD
3、Z)一致的序列,即PDZ結(jié)構(gòu)域。Spinophilin具有細(xì)胞骨架腳手架蛋白的特性,腳手架蛋白能將信號分子定位,影響神經(jīng)元的功能,包括突觸塑形。因此,Spinophilin對興奮性突觸傳遞和樹突棘的形態(tài)有顯著的調(diào)節(jié)作用。 δ-catenin是p-120catenin家族中特異性表達(dá)在神經(jīng)系統(tǒng)中的成員,它有十個(gè)特征性的能與近膜端的經(jīng)典鈣粘素結(jié)合的Arm重復(fù)序列。它限定在突觸后成分,并在突觸區(qū)域形成了非對稱性的附著連接。它通過其羧基
4、末端的結(jié)合位點(diǎn)與眾多含PDZ結(jié)合域的蛋白質(zhì)結(jié)合,并在細(xì)胞連接的構(gòu)成中起作用。δ-catenin能形成蛋白質(zhì)復(fù)合體,并在體外直接與纖絲狀肌動(dòng)蛋白(F-actin)結(jié)合。其表達(dá)后能在3T3細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞形成樹突狀分支突起,并增加原代海馬細(xì)胞中樹突形成。小鼠δ-catenin基因的定向突變表明其在正常突觸功能中起到重要作用。作為附著連接和突觸連接家族的共同成分,δ-catenin將附著連接結(jié)合在突觸上,并因此協(xié)調(diào)突觸輸入和附著連接的變化。此外
5、,δ-catenin還能與F-actin結(jié)合,和spinophilin共同調(diào)節(jié)樹突棘的形態(tài)和密度,從而進(jìn)一步影響樹突棘突觸的可塑性。 雌激素由卵泡的顆粒細(xì)胞和黃體細(xì)胞所分泌,有雌二醇、雌酮、雌三醇等,其中雌二醇分泌量最大,活性最強(qiáng)。雌激素在雌性動(dòng)物有抗老化作用,它通過其受體影響雌性動(dòng)物的行為,情緒,認(rèn)知和記憶等多方面的功能。雌激素可能調(diào)節(jié)spinophilin和δ-catenin的表達(dá),并進(jìn)一步影響樹突棘形態(tài)和密度。 本
6、實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹荚谘芯看萍に靥娲委煂Υ笫笮∧Xspinophilin和δ-catenin表達(dá)的作用和影響。實(shí)驗(yàn)中取SD大鼠制作卵巢切除雌激素替代模型,以免疫組織化學(xué),Westernblot,RT-PCR觀察大鼠小腦中spinophilin和δ-catenin的表達(dá)及其變化。免疫組化檢測顯示:spinophilin和δ-catenin存在于小腦的分子層和顆粒層,蒲氏細(xì)胞胞漿中也可見的陽性顆粒。手術(shù)安慰劑組中spinophilin和δ-caten
7、in陽性顯著弱于其他二組;假手術(shù)組spinophilin和δ-catenin陽性略強(qiáng)于雌激素替代組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Westernblot結(jié)果表明:spinophilin,δ-catenin在安慰劑組大鼠小腦中表達(dá)最低,與其它二組有顯著性差異,假手術(shù)組和雌激素替代組大鼠小腦中spinophilin,δ-catenin的表達(dá)量無顯明差異。RT-PCR顯示:各組中spinophilinmRNA表達(dá)無差異;但δ-cateninmRNA在安慰劑
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