植物雌激素對去卵巢血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響.pdf

1、目的：研究植物雌激素對去卵巢血管性癡呆(vasculardementia，VD)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，并應(yīng)用免疫組化的方法觀察大鼠海馬結(jié)構(gòu)神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase，nNOS)及神經(jīng)肽Y(neuropeptideY，NPY)免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)的變化，探討植物雌激素對中樞神經(jīng)系統(tǒng)(centralnervoussystem，CNS)的保護(hù)作用及可能的機(jī)制。 方法：采用Morris

2、水迷宮篩選空間學(xué)習(xí)記憶能力正常的雌性Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為4組，每組15只：①.假手術(shù)及普通喂養(yǎng)對照組(SO組)：只切除卵巢周圍部分脂肪，基礎(chǔ)飼料自由飲食70d；②.去卵巢及普通喂養(yǎng)對照組(OO組)：切除雙側(cè)卵巢后，基礎(chǔ)飼料自由飲食70d；③.去卵巢及苯甲酸雌二醇注射組(OE組)：切除雙側(cè)卵巢后第二天，在基礎(chǔ)飼料自由飲食的基礎(chǔ)上，給予苯甲酸雌二醇(45μg/kg)隔日肌肉注射一次共70d；④.去卵巢及大豆異黃酮喂養(yǎng)組(OS組)

3、：切除雙側(cè)卵巢后第二天起，在基礎(chǔ)飼料自由飲食的基礎(chǔ)上，大豆異黃酮(120mg/kg)每日灌胃一次共70d。去卵巢術(shù)后21天，將所有大鼠雙側(cè)頸總動脈夾閉10min后，開通10min，再夾閉10min，再次開通后縫合傷口以制備VD大鼠模型。此次造模術(shù)后49天再次連續(xù)4天應(yīng)用Morris水迷宮測試大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化，整個(gè)行為學(xué)研究過程由水迷宮測試系統(tǒng)記錄大鼠尋找水下平臺的潛伏期(latency,L)、距離(distance，D)、游泳

4、速度(velocity,V)等相關(guān)參數(shù)。最后一次迷宮測試結(jié)束后將各組大鼠灌注固定、取腦、切片，應(yīng)用免疫組化方法檢測各組大鼠海馬結(jié)構(gòu)神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase，nNOS)和神經(jīng)肽Y(neuropeptideY，NPY)免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞的表達(dá)。 結(jié)果：(1)在術(shù)前第1次水迷宮測試中，隨著訓(xùn)練次數(shù)的增加，全部大鼠越來越趨向于在有平臺位置的搜索，并且游泳距離越來越短，其結(jié)果表明大鼠通過訓(xùn)

5、練后建立了不同程度的空間記憶。同日各組大鼠之間尋找水下平臺的潛伏期(L)、距離(D)、游泳速度(V)沒有顯著性差異(P＞0.05)；(2)在VD大鼠模型制備術(shù)后49天第2次水迷宮測試中，OO組的游泳距離(D)及潛伏期(L)明顯較同日的SO組、OE組及OS組延長，差異有顯著性(P＜0.05)；各組大鼠之間的游泳速度(V)沒有顯著性差異(P＞0.05)。以上結(jié)果提示去卵巢血管性癡呆大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶受到了損害，而添加雌激素可減輕此種損害。(

6、3)OO組大鼠海馬中nNOS免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞在CA1、CA2、CA3、CA4及錐體細(xì)胞層、顆粒層、齒狀回分布稀疏，數(shù)目較相應(yīng)的SO、OE、OS組明顯減少(P＜0.05)，而SO組與OE、OS組相比較無明顯變化(P＞0.05)。OO組大鼠海馬中NPY免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞在CA1、CA2、CA3、CA4及錐體細(xì)胞層、顆粒層、齒狀回，同樣分布稀疏，數(shù)目較相應(yīng)的SO、OE、OS組明顯減少(P＜0.05)，而SO組與OE、OS組相比較無明顯變化(P＞