FAP-1與腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)性的研究.pdf

1、目的:(1)檢測(cè)FAP-lmRNA、Fas mRNA在人肺癌細(xì)胞A549及人宮頸癌細(xì)胞HeLa的表達(dá).(2)了解蛋白質(zhì)合成抑制劑放線菌素D對(duì)FAP-1mRNA、Fas mRNA表達(dá)的影響.(3)觀察經(jīng)抗Fas抗體(CH-11)誘導(dǎo)后,A549細(xì)胞及HeLa細(xì)胞對(duì)凋亡的敏感性.(4)分析放線菌素D對(duì)Fas介導(dǎo)凋亡的敏感性的影響,探討FAP-1的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞凋亡的相關(guān)性.方法:(1)半定量RT-PCR法檢測(cè)A549細(xì)胞及HeLa細(xì)胞FAP

2、-1mRNA、Fas mRNA的表達(dá),(2)不同濃度的放線菌素D,分別對(duì)A549細(xì)胞和HeLa細(xì)胞干預(yù)不同時(shí)間后,進(jìn)一步檢測(cè)干預(yù)后腫瘤細(xì)胞FAP-1mRNA、Fas mRNA的表達(dá)并選擇放線菌素D最適作用時(shí)間與濃度.(3)放線菌素D干預(yù)前后的腫瘤細(xì)胞分別經(jīng)抗Fas抗體(CH-11)誘導(dǎo)后,電子顯微鏡及瓊脂糖凝膠電泳法觀察其凋亡現(xiàn)象,以AO染色法檢測(cè)其凋亡率、以MTT法檢測(cè)其存活率,并對(duì)各組結(jié)果進(jìn)行比較.結(jié)論:(1)A549細(xì)胞表達(dá)FAP

3、-1 mRNA、Fas mRNA,而HeLa細(xì)胞表達(dá)FasmRNA,未見(jiàn)有FAP-1 mRNA表達(dá).(2)放線菌素D可下調(diào)A549細(xì)胞FAP-1mRNA的表達(dá),并呈現(xiàn)濃度和時(shí)間依賴(lài)效應(yīng).放線菌素D對(duì)A549細(xì)胞及HeLa細(xì)胞Fas mRNA的表達(dá)無(wú)明顯影響.(3)HeLa細(xì)胞對(duì)抗Fas抗體誘導(dǎo)的凋亡敏感,對(duì)抗Fas抗體的誘導(dǎo)呈濃度依賴(lài)性.(4)A549細(xì)胞抵抗抗Fas抗體誘導(dǎo)的凋亡,放線菌素D可提高其對(duì)凋亡的敏感性.(5)FAP-1 m