MRI信號比值與神經(jīng)細胞凋亡相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：隨著MRI成為目前脊柱脊髓病變最有價值的檢查以來，許多學(xué)者和臨床工作者通過對MRI信號變化與患者臨床癥狀相比較，對MRI信號判斷預(yù)后等問題進行了大量研究，得出的結(jié)論不一。同時對于MRI信號產(chǎn)生的機制，特別對于MRI T2高信號產(chǎn)生的機制及其所代表的微觀變化有較多研究，但目前尚無統(tǒng)一定論。目前多數(shù)觀點認為神經(jīng)細胞凋亡在脊髓病變的發(fā)病機制中起著至關(guān)重要的作用，但不同強度的MRI T2高信號與神經(jīng)細胞凋亡程度之間是否存在某種關(guān)聯(lián)，目前還

2、無類似問題的探討。本研究旨在通過建立慢性壓迫性脊髓疾病動物模型，觀察記錄慢性受壓的頸脊髓MRI信號的變化，并進行相應(yīng)神經(jīng)細胞凋亡檢測，進一步對這兩者之間關(guān)系進行探討，從而為脊髓MRI信號改變產(chǎn)生機制的深入研究提供新的方向。
　　方法：將試驗用，雄性，3個月月齡新西蘭大白兔32只，隨機挑選8只實驗動物作為對照組，余作為實驗組，并給予每只實驗動物進行編號。術(shù)前將所有白兔進行皮層體感誘發(fā)電位(CSEP)檢查。實驗組按照兔脊髓型頸椎病動物

3、模型的要求建立動物模型，對照組除不植入自制樹脂脊髓壓迫釘外，其他手術(shù)步驟同實驗組。術(shù)后立即進行皮層體感誘發(fā)電位(CSEP)檢查復(fù)查，未見急性脊髓損傷圖形。術(shù)后三個月開始每1個月給予所有實驗動物行CSEP檢測，采用改良Tarlov's運動功能評分法進行運動功能評估。術(shù)后6個月將所有實驗動物進行MRI檢查并計算MRI T2信號比值(比值=高信號強度值/正常信號強度值，取脊髓受壓信號增高最明顯部位或脊髓受壓最嚴(yán)重部位為高信號強度值，取頸7胸1

4、椎體水平脊髓信號正常部位為正常信號值)，記錄信號比值大小。MRJ檢測完畢后將所有實驗動物處死并取受壓迫脊髓部位甲醛固定后行HE巳染色光鏡觀察，Bcl-2和Bax免疫組織化學(xué)染色(結(jié)果判斷：細胞內(nèi)有棕黃色粗顆粒分布或棕黃色細膩顆粒彌漫分布者為陽性反應(yīng))。用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS13.0處理數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，方法采用雙變量相關(guān)與回歸分析。
　　結(jié)果：皮層體感誘發(fā)電位(CSEP)結(jié)果：實驗組所有白兔隨著脊髓受壓時間延長，CSEP的波幅以及

5、潛伏期均產(chǎn)生了明顯的變化，其潛伏期P15逐漸延長；對照組未見明顯變化。改良Tarlov's運動功能評分法進行功能評分：實驗組白兔隨著脊髓受壓時間的延長，Tarlov’s運動功能評分逐漸降低，與對照組相比有顯著性差異；對照組未見明顯神經(jīng)功能受損癥狀。MRI檢測結(jié)果：實驗組肉眼可見MRI T2高信號信號強度不等，信號強度比值計算結(jié)果為：1.01至1.15不等；對照組白兔均未觀察到明顯肉眼高信號。實驗室檢查：對照組HE染色可見白質(zhì)中軸突排列整

6、齊，膠質(zhì)細胞規(guī)整，灰質(zhì)神經(jīng)元細胞飽滿，胞漿豐富；白質(zhì)及灰質(zhì)中見少量Bcl-2和Bax弱陽性細胞，胞質(zhì)著色成棕黃色，胞核中空。隨著MRI T2信號比值增加，實驗組細胞形態(tài)及Bax，Bcl-2表達量均發(fā)生不同程度的變化。信號比值較低組(比值為1.01-1.05)HE染色白質(zhì)中可見腫脹的軸突，軸突周圍有部分形成較大的空泡，灰質(zhì)中神經(jīng)元細胞數(shù)目未見明顯減少，細胞皺縮，胞質(zhì)豐富，核濃縮；Bax與對照組相比表達增多，胞質(zhì)棕黃色程度加深；Bcl-2細

7、胞棕黃色出現(xiàn)向核內(nèi)轉(zhuǎn)染。信號比值最高組(信號1.11-1.15)HE染色可見脊髓組織主要結(jié)構(gòu)不清甚至消失，組織明顯水腫、細胞成分明顯減少。白質(zhì)中軸突纖維排列紊亂，絕大部分神經(jīng)軸突周圍的間隙變大，明顯呈空泡樣改變，灰質(zhì)中可見神經(jīng)元細胞皺縮明顯，細胞核固縮，Niss1體消失；Bax表達最多，棕黃色最明顯；Bcl-2核內(nèi)棕黃色陽性最明顯。中等信號比值組(1.06-1.10)HE染色細胞形態(tài)及Bax，Bcl-2免疫組化檢測結(jié)果位于低信號和高信號

8、組之間。Bax，Bcl-2光密度結(jié)果：隨著MRI T2信號比值逐漸增大，Bax光密度值逐漸加大，Bcl-2光密度值逐漸減小，統(tǒng)計學(xué)分析(采用雙向變量回歸與相關(guān)分析)各結(jié)果，MRI信號比值與灰質(zhì)Bax，白質(zhì)Bax成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為：0.87、0.90；MRI信號比值與灰質(zhì)Bcl-2，白質(zhì)Bcl-2成負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為：0.88、0.86。
　　結(jié)論：慢性壓迫性脊髓損傷導(dǎo)致的MRI T2高信號出現(xiàn)與神經(jīng)細胞凋亡密切相關(guān)，并且