SERPINB1與肝細(xì)胞肝癌的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　研究SERPINB1在肝細(xì)胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表達(dá)情況,初步分析SERPINB1異常表達(dá)與HCC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,旨在能夠進(jìn)一步揭示HCC的分子發(fā)病機(jī)制,為其治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法：
　　1.為了研究SERPINB1在HCC中組織學(xué)水平的表達(dá),本研究通過western blot技術(shù)檢測8例HCC及癌旁新鮮冰凍組織中SERPINB1的表達(dá)情況;采用免疫組化

2、方法檢測67例HCC及癌旁組織石蠟切片中SERPINB1的表達(dá)情況,并結(jié)合HCC臨床病理資料分析SERPINB1與HCC患者的年齡、性別、腫瘤分級(jí)和轉(zhuǎn)移以及血清AFP等因素之間的關(guān)系,并對(duì)其進(jìn)行隨訪,對(duì)隨訪結(jié)果應(yīng)用Kaplan-Meier法分析HCC患者生存率,以及單因素和Cox危險(xiǎn)比例模型多因素分析SERPINB1與HCC預(yù)后的關(guān)系。
　　2.為了研究SERPINB1在HCC細(xì)胞學(xué)水平的表達(dá),本研究通過采用正常肝細(xì)胞LO2及HC

3、C細(xì)胞中用western blot技術(shù)檢測SERPINB1的表達(dá)情況;對(duì)HCC細(xì)胞株HuH7及BEL-7404進(jìn)行SERPINB1的轉(zhuǎn)染小干擾,用劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移和侵襲能力,用CCK8檢測細(xì)胞增殖活性,用western blot技術(shù)檢測活化的MMP-2的表達(dá)情況。明確SERPINB1對(duì)HCC的遷移和侵襲的影響。
　　結(jié)果：
　　1.免疫組化及western blot分析顯示,SERPINB1在

4、HCC組織中的表達(dá)明顯低于對(duì)應(yīng)的HCC癌旁組織,SERPINB1的表達(dá)強(qiáng)度與 HCC轉(zhuǎn)移(p=0.000)和侵襲(p=0.006)之間的關(guān)系有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Kaplan-Meier分析顯示SERPINB1在HCC中的低表達(dá)與患者總生存率的降低顯著相關(guān)(p=0.001)。單因素分析表明SERPINB1與HCC病人的不良預(yù)后有關(guān)(p=0.002)。Cox危險(xiǎn)比例模型分析顯示SERPINB1可做為HCC預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)(p=0.023)。

5、　　2.應(yīng)用western blot分析顯示在正常肝細(xì)胞LO2及HCC細(xì)胞株中SERPINB1的表達(dá)情況,在HCC細(xì)胞中表達(dá)水平要低于正常肝細(xì)胞LO2中的表達(dá)水平。對(duì)SERPINB1表達(dá)相對(duì)高的HuH7和BEL-7404進(jìn)行了SERPINB1轉(zhuǎn)染小干擾后,發(fā)現(xiàn)SERPINB1能夠抑制HuH7及BEL-7404細(xì)胞的遷移和侵襲,但是不影響細(xì)胞的增殖活性。在轉(zhuǎn)染了si-SERPINB1的細(xì)胞中活化的MMP-2表達(dá)水平明顯升高。
　　結(jié)