上半規(guī)管裂所致第三窗對耳蝸傳音功能影響的實驗研究.pdf

1、目前已知的與耳蝸傳音障礙相關(guān)的疾病包括:半規(guī)管裂、迷路瘺管、前庭導(dǎo)水管擴大、內(nèi)淋巴積水相關(guān)疾病等。這類疾病臨床表現(xiàn)各異，但均存在耳蝸傳音結(jié)構(gòu)上的器質(zhì)性病變。半規(guī)管裂是耳蝸傳音障礙疾病的典型代表，以半規(guī)管骨壁的缺損為重要病理特征，并由此導(dǎo)致膜迷路的膨出，及淋巴液壓力的降低;目前對半規(guī)管裂的發(fā)病機理主要以第三窗假說來解釋，但缺乏有力的實驗證據(jù)。我們推測半規(guī)管裂引起淋巴液物理性能改變，造成其傳音時的壓力波變異，從而導(dǎo)致基底膜行波和Corti器

2、局部微觀淋巴液靜力學(xué)和動力學(xué)改變，最終導(dǎo)致了聲能在耳蝸內(nèi)傳遞發(fā)生障礙。深入研究耳蝸外淋巴液壓力波在半規(guī)管裂的變化情況，將有助于驗證這些疾病的致病假說，闡明其導(dǎo)致聽力損傷的發(fā)病過程。本研究將從以下三個部分展開討論。
　　第一部分豚鼠和尸頭上半規(guī)管裂模型的建立及上半規(guī)管裂對內(nèi)耳淋巴液壓力波的影響
　　豚鼠組14只豚鼠，近前庭造上半規(guī)管裂造模側(cè)與非造模側(cè)前庭半規(guī)管冰凍切片HE染色觀察造模后的局部結(jié)構(gòu)變化;用激光多普勒測振儀測量造模

3、前后及裂隙修補后鼓膜，鐙骨頭，圓窗膜，裂隙處的振動;取實驗結(jié)束的上半規(guī)管裂模型的豚鼠的耳蝸基底膜，橢圓囊斑，球囊斑及壺腹脊鋪片phalloidin染色，熒光顯微鏡下分別觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)。
　　人尸頭標本組，6耳新鮮冰凍解凍標本及2耳新鮮標本上半規(guī)管裂造模;用激光多普勒測振儀測量造模前后及裂隙修補后鼓膜，鐙骨頭，圓窗膜，裂隙處的振動。
　　豚鼠造上半規(guī)管裂模型后冰凍切片HE染色，光鏡下觀察模型能保留上半規(guī)管骨內(nèi)膜，達到造模要求;

4、豚鼠造上半規(guī)管裂后聲信號在300-1500Hz鼓膜及鐙骨頭的振動增加，圓窗膜振動減小，內(nèi)耳阻抗降低，上半規(guī)管裂處有振動能量泄漏，前庭的淋巴壓力波增強，耳蝸的淋巴液壓力波減弱，修補上半規(guī)管裂隙后振動恢復(fù);上半規(guī)管裂模型的豚鼠的耳蝸基底膜，橢圓囊斑，球囊斑及壺腹脊鋪片phalloidin染色，熒光顯微鏡下觀察毛細胞無缺失，形態(tài)無紊亂。
　　新鮮冰凍解凍標本及新鮮標本造上半規(guī)管裂都不易保留骨內(nèi)膜，會有淋巴液外溢;新鮮冰凍解凍完整人尸頭上

5、半規(guī)管裂前后及修補前后鼓膜，鐙骨頭及圓窗膜的振動無顯著差異;新鮮尸頭上半規(guī)管裂模型后500Hz-1200Hz鼓膜及鐙骨的振動增加，圓窗振動減小，內(nèi)耳阻抗降低，耳蝸的淋巴液壓力波減弱。
　　第二部分豚鼠不同大小和部位上半規(guī)管裂對內(nèi)耳淋巴液壓力波的影響
　　豚鼠24只按上半規(guī)管造裂的部位（近前庭和遠前庭）和大小(0.5mm×0.5mm和0.5mm×1.0mm)組合分4組，每組6只，用激光多普勒測振儀測量造模前后及修補后鼓膜、鐙骨

6、頭、圓窗及裂隙修補處的振動。
　　豚鼠造上半規(guī)管裂后，聲信號在300Hz-1500Hz鼓膜及鐙骨的振動增加，圓窗振動減小，淋巴液壓力波降低，上半規(guī)管裂處有能量泄漏;修補上半規(guī)管裂后振動恢復(fù)，淋巴液壓力波恢復(fù);豚鼠在近前庭造上半規(guī)管裂后，聲信號在500Hz-1000Hz范圍內(nèi)1×0.5mm上半規(guī)管裂的內(nèi)耳淋巴液壓力波降低大于0.5×0.5mm上半規(guī)管裂的內(nèi)耳淋巴液壓力波降低;近前庭上半規(guī)管裂聲信號在400Hz-800Hz內(nèi)耳淋巴液壓

7、力波降低大于遠前庭上半規(guī)管裂的內(nèi)耳淋巴液壓力波降低。
　　第三部分上半規(guī)管裂所致第三窗對豚鼠聽力的影響
　　測量6只豚鼠近前庭大小為0.5mm×0.5mm組的造裂前、造裂后及裂隙修補后的腦干誘發(fā)電位變化。豚鼠上半規(guī)管裂后的腦干誘發(fā)電位閾值在250-1000Hz升高（1000Hz時P＜0.05），修復(fù)后閾值恢復(fù);對照組無顯著變化。
　　結(jié)論豚鼠及新鮮尸頭標本的上半規(guī)管裂模型能有效用于研究上半規(guī)管裂疾病;豚鼠和新鮮尸頭標本