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文檔簡介
1、背景和目的:宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一,其組織學類型主要有鱗癌和腺癌,鱗癌占宮頸癌的大多數(shù),但近年來宮頸腺癌的發(fā)病率有上升趨勢,尤其在較年輕的年齡組發(fā)病率明顯上升。目前宮頸腺癌的病因及發(fā)病機制尚不清楚。其早期診斷和鑒別診斷困難。較之鱗癌更易于發(fā)生血行和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。對于癌前病變的認識遠不如宮頸鱗癌癌前病變那樣明確和熟悉。因此,宮頸腺癌引起了人們的普遍關注。與張力蛋白同源、第10染色體缺失的磷酸酶基因(phosphate and te
2、nsinhomology deleted on chromose ten,PTEN)基因是1997年發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因,對細胞的增殖、分化和凋亡起重要的調(diào)節(jié)作用。其在多種腫瘤組織中存在突變?nèi)笔Ш捅磉_異常,尤其在子宮內(nèi)膜癌中為突變率最高的基因,且為子宮內(nèi)膜癌癌變過程中的早期事件。由于宮頸腺癌與子宮內(nèi)膜癌在病因?qū)W和組織學形態(tài)上有相似性,推測PTEN基因在宮頸腺癌癌變過程中與子宮內(nèi)膜癌有類似。PTEN在宮頸腺癌中的表達情況研究較少,而PTEN
3、在宮頸腺癌中的突變情況在國內(nèi)尚未見報道。宮頸腺癌癌前病變中PTEN基因突變情況在國內(nèi)外均尚未見報導,有進一步研究的必要。高危型人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染已被認為是宮頸鱗癌發(fā)病的必要因素,而在宮頸腺癌中的感染情況研究較少,但現(xiàn)有的研究結(jié)果顯示高危型HPV感染與宮頸腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關。普遍認為在宮頸癌的發(fā)生過程中除HPV感染以外,還需其他的分子事件的參與,抑癌基因的失活就是其機制之一。本研究檢
4、測了正常宮頸腺上皮組織、宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤和宮頸腺癌中抑癌基因PTEN的表達和突變和HPV感染情況,探討PTEN基因表達和突變與HPV感染在宮頸腺癌發(fā)生中的作用,分析宮頸腺癌發(fā)生機制中PTEN基因與HPV的關系,以期發(fā)現(xiàn)較好的宮頸腺癌早期診斷分子指標。
材料和方法:42例宮頸腺癌和20例宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤存檔蠟塊取自鄭州大學第一附屬醫(yī)院病理科、鄭州大學第三附屬醫(yī)院病理科和鄭州市婦幼保健院病理科,并按WHO宮頸腺癌的分型標準分型。4
5、2例宮頸腺癌中粘液腺癌19例,子宮內(nèi)膜樣腺癌10例,其它變型13例(漿液型腺癌2例,透明細胞癌4例,腺鱗癌5例,低分化難以分型的癌2例),所有病例由兩位經(jīng)驗豐富的病理醫(yī)師復驗證實。正常宮頸組織28例,為鄭州大學第一附屬醫(yī)院病理科因子宮肌瘤手術(shù)切除的正常宮頸組織存檔蠟塊。宮頸腺癌組、宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤組、正常宮頸腺上皮組中<45歲者分別有29例、15例、18例,≥45歲者分別有13例、5例、10例,三組間年齡構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.
6、05)。免疫組化SP法檢測42例宮頸腺癌、20例宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤和28例正常宮頸腺上皮組織中PTEN蛋白表達,PCR-SSCP(polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism)法檢測上述90例組織中PTEN基因第5、8外顯子突變情況,原位雜交廣譜HPV探針檢測90例標本的HPV感染情況。多個率的比較采用行×列表的x~2檢驗、兩個率的比較采用四格表資料的
7、x~2檢驗和Fisher確切概率法,相關性分析采用Spearman相關分析。用SPSS11.5軟件進行數(shù)據(jù)處理。取雙側(cè)α=0.05為檢驗水準。
結(jié)果:1.宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤、宮頸腺癌和正常宮頸腺上皮組織PTEN陽性表達率分別為25.00%(5/20)、54.76%(23/42)和100.00%(28/28)。宮頸腺癌和宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤PTEN陽性表達率均低于正常宮頸腺上皮組織,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤P
8、TEN陽性表達率低于宮頸腺癌,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。宮頸腺癌不同組織學變型中粘液型腺癌、子宮內(nèi)膜樣型腺癌和其它變型PTEN陽性表達率分別為47.37%(9/19),20.00%(2/10)和92.31%(12/13),粘液型腺癌和子宮內(nèi)膜樣型腺癌PTEN陽性表達率均低于其它變型,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。子宮內(nèi)膜樣型腺癌PTEN陽性表達率和粘液型腺癌差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。2.宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤和宮頸腺癌PT
9、EN外顯子5、8突變率分別為45.00%(9/20)和19.04%(8/42),正常宮頸組織中未檢測到突變標本。宮頸腺癌和宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤PTEN外顯子5、8突變率均高于正常宮頸組織,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤PTEN外顯子5、8突變率高于宮頸腺癌,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。宮頸腺癌不同組織學變型中粘液型腺癌和子宮內(nèi)膜樣型腺癌PTEN基因外顯子5、8突變率分別為21.05%(4/19)和40.00%(4/
10、10),其它變型外顯子5、8突變?yōu)?(0/13)。子宮內(nèi)膜樣型腺癌PTEN外顯子5、8突變率高于其它變型,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。粘液型腺癌PTEN外顯子5、8突變率與子宮內(nèi)膜樣型、其它變型相比差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3.PTEN基因突變與PTEN蛋白表達呈負相關,兩者關系密切(P<0.05,r_s=-0.619,Pearson列聯(lián)系數(shù)P=0.964),PTEN基因突變組蛋白表達無1例陽性,而未突變組陽性表達56例
11、,PTEN突變組蛋白表達陽性率低于未突變組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。4.宮頸腺癌、宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤、宮頸正常腺上皮HPV感染陽性率分別為為57.14%(24/42)、60.00%(12/20)和17.86%(5/28)。宮頸腺癌、宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤中的HPV感染陽性率均高于正常宮頸腺上皮組織,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),宮頸腺癌中HPV感染陽性率與宮頸腺上皮內(nèi)腫瘤差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。5.HPV陽性組PTEN表
12、達缺失率為36.59%(15/41),HPV陰性組PTEN表達缺失率為38.78%(19/49),兩者相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。6.HPV陽性組PTEN基因第5、8外顯子突變率為4.89%(2/41)。HPV陰性組PTEN基因第5、8外顯子突變率為30.61%(15/49),HPV感染與PTEN突變相關,呈負相關(P<0.05,r_s=-0.327)。HPV陰性組PTEN基因突變率高于HPV陽性組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.
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