卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球靶向治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、化療是治療中晚期肝癌和消滅術(shù)后殘留微小癌灶的重要方法，但傳統(tǒng)的全身化療和肝動(dòng)脈灌注化療的治療效果不佳，而且化療藥物對(duì)正常組織還會(huì)產(chǎn)生明顯的毒副作用。磁靶向納米藥物微球是將化療藥物、超順磁性內(nèi)核包入高分子材料中，制成具有“長(zhǎng)循環(huán)”特性的納米級(jí)微粒，經(jīng)血管注入體內(nèi)后，它在體外磁場(chǎng)的作用下滯留于靶區(qū)，定向平穩(wěn)釋放藥物殺傷腫瘤細(xì)胞，同時(shí)降低藥物全身分布所造成的毒副作用。本研究在成功制備卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球的基礎(chǔ)上，觀察其體外對(duì)人肝癌細(xì)胞系

2、HepG2的增殖和細(xì)胞周期的影響。以移植性肝癌大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，觀察卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球?qū)Υ笫笠浦残愿伟┑闹委熜Ч蛯?duì)機(jī)體的毒副作用。 第一部分：卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球?qū)θ烁伟┘?xì)胞株HepG2的影響 目的：觀察卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球(C-Fe@CN-CN)對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2增殖和細(xì)胞周期的影響。 方法：應(yīng)用反相微乳法制備C-Fe@CN-CN，采用MTT法檢測(cè)不同藥物濃度(20、40、80、160

3、mg/L)的C-Fe@CN-CN對(duì)HepG2細(xì)胞作用24、48、72h的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)；計(jì)算IC50，繪制生長(zhǎng)曲線。流式細(xì)胞儀分析藥物濃度為8、16mg/L，作用48h時(shí)細(xì)胞周期的改變。 結(jié)論：C-Fe@CN-CN在體外能有效地抑制肝癌細(xì)胞增殖，機(jī)制與原藥相同，均為誘導(dǎo)S期阻滯。空白微球表現(xiàn)出良好的生物相容性。 第二部分：卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球?qū)Υ笫笠浦残愿伟┑陌邢蛑委熜Ч?目的：觀察C-Fe@CN-CN經(jīng)肝動(dòng)

4、脈注射結(jié)合體外磁場(chǎng)對(duì)大鼠移植性肝癌的靶向治療效果。 方法：建立24只大鼠移植性肝癌模型，隨機(jī)分為4組(n=6)。大鼠正中開(kāi)腹行肝動(dòng)脈插管，A組注入生理鹽水為對(duì)照組；B組注入游離卡鉑的生理鹽水溶液；C組注入C-Fe@CN-CN的生理鹽水分散液，腫瘤部位不加磁場(chǎng)；D組注入C-Fe@CN-CN的生理鹽水分散液，腫瘤部位加磁場(chǎng)；B、C、D組卡鉑量均為10mg/kg體重。給藥后第7天，大鼠再次開(kāi)腹，完整切除腫瘤，測(cè)量腫瘤體積、重量，計(jì)算瘤

5、重抑制率。病理切片觀察腫瘤病理變化和卡鉑微球沉積情況。 結(jié)論：C-Fe@CN-CN經(jīng)肝動(dòng)脈注射結(jié)合腫瘤區(qū)磁場(chǎng)引導(dǎo)，可顯著性增強(qiáng)卡鉑的抗腫瘤效果。 第三部分：卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球靶向治療大鼠移植性肝癌的毒副作用 目的：觀察C-Fe@CN-CN結(jié)合體外磁場(chǎng)靶向治療大鼠移植性肝癌的毒副作用。 方法：建立24只大鼠移植性肝癌模型，隨機(jī)分為4組(n=6)。大鼠正中開(kāi)腹，行肝動(dòng)脈插管，A組經(jīng)肝動(dòng)脈注入生理鹽水為

6、對(duì)照組；B組注入游離卡鉑的生理鹽水溶液；C組注入C-Fe@CN-CN的生理鹽水分散液，腫瘤部位不加磁場(chǎng)；D組注入C-Fe@CN-CN的生理鹽水分散液，腫瘤部位加磁場(chǎng)；B、C、D組卡鉑量均為10mg/kg體重。給藥前和給藥后第2、4和7天，測(cè)量大鼠體重，斷尾取血測(cè)定WBC、RBC和PLT數(shù)量。給藥后第7天，大鼠再次開(kāi)腹，取腹主動(dòng)脈血，測(cè)血清ALT，AST，TP，ALB，BUN和Cr。取骨髓觀察粒細(xì)胞—巨噬細(xì)胞集落(CFU-GM)形成情況。