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文檔簡介
1、糖尿病是臨床常見的內(nèi)分泌代謝性疾病之一,中藥血竭及其提取物對于治療糖尿病有重大的潛在意義。以活性為指導(dǎo)的中藥有效成分的篩選方式具有簡單便捷的特點,也為中藥中金屬元素與藥效關(guān)系的研究提供支持。本論文工作以活性為指導(dǎo),對中藥血竭進行分離提取,得到若干對α-葡萄糖苷酶具有抑制力的活性組分;并對組分中金屬元素的含量、化學(xué)形態(tài)與活性進行相關(guān)性分析,內(nèi)容具體如下: (一)測定了五種不同來源血竭中金屬元素鐵、錳、銅、鈣、鎂含量及對α-葡萄糖苷
2、酶的抑制活力,結(jié)果表明:進口的新加坡血竭中的各金屬元素含量最高,而其活性最低,國產(chǎn)四種血竭中的金屬元素含量較低,活性相近,且明顯都高于進口血竭;在同一血竭的金屬元素中Ca的含量最高,其次依次為Mg、Fe、Mn、Cu,不同產(chǎn)地血竭金屬元素含量明顯不同,同一產(chǎn)地同一元素含量較為接近,以上結(jié)果可為中藥材的鑒別及藥效提供依據(jù)。 (二)用有機溶劑萃取分離得到的一系列活性組分,對其活性及其中五種金屬元素含量進行了測定,結(jié)果表明:芒果牌龍血竭
3、原藥經(jīng)過石油醚索氏抽提脫脂,各元素的含量明顯增加;石油醚索氏抽提殘余物經(jīng)丙酮萃取,金屬元素發(fā)生明顯遷移:萃取物中每種元素含量低于萃余物,丙酮萃取物活性較高;將丙酮萃取物經(jīng)乙酸乙酯萃取,出現(xiàn)類似情況;另外發(fā)現(xiàn),鈣、鎂兩種元素的遷移尤為明顯。 (三)測定了多次水煎得到的一系列活性組分中金屬元素含量及相應(yīng)活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn):隨著水煎次數(shù)的增加,鐵、銅含量發(fā)生富集;錳、鈣、鎂含量逐漸減少,其中鈣、鎂尤為明顯;血竭的活性隨水煎次數(shù)的增加呈提高
4、趨勢。 (四)應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS12.0,基于多元逐步回歸分析對血竭活性組分中金屬元素含量及其活性進行相關(guān)性研究,得到回歸模型[ID50]=-0.522+0.013[Ca]+0.234[Mn](R=0.975,P<0.05),并對此模型進行了實驗驗證,篩選出兩個對α-葡萄糖苷酶抑制劑活性具有顯著影響的元素鈣和錳。 (五)結(jié)合高效液相圖譜和紅外圖譜,對有機溶劑法及水煎法得到的活性有機成分進行分析,發(fā)現(xiàn)鐵元素在血竭中與極性
5、較小的有機成分結(jié)合的比例較高,而鈣、鎂與極性較大的有機成分結(jié)合比例較高。 (六)參照中藥微量元素形態(tài)分析方法,對血竭中金屬元素形態(tài)進行分析,得到各元素的溶出率分別為Ca:99.51%,Mg:96.93%,F(xiàn)e:10.65%,Mn:63.38%,Cu:14.64%;血竭溶出部分中,懸浮態(tài)與可溶態(tài)比例分別為:鐵60:100;錳27:100;鈣12:100;鎂34:100;可溶性部分中,無機態(tài)與有機態(tài)比例分別為:鐵100:22;鈣10
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