瘦素與新生兒體重的關(guān)系及在胎盤中的表達.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文瘦素與新生兒體重的關(guān)系及在胎盤中的表達姓名：劉彤申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：尚濤20000401血清，一20’C保存待測，采用進口RIAKit(LineesearchStLouis，MO)測定100對母兒血清leptin水平。最低可測濃度為05ng／ml。批間CV49％，批內(nèi)CV45％。胎盤娩出后，于近臍根部胎盤母體面取10cm10cm05cm大小胎盤組織，一70℃保存待測。采用RTPCR技術(shù)測定4

2、1例胎盤組織teptinmRNA水平。(1)總RNA的提取：胎盤組織019剪碎，加Triz01液lml，吹打呈勻漿狀，加氯仿、異丙醇、乙醇等處理提取RNA。(2)cDNA的合成：取lttlRNA，2buffer5弘l、MgS042弘l，dNTPs059I，Boa——BESTPolymerase059l，OligodTPrimer05sl，RNase025ttl，進行逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。(3)PCR擴增：lep—tin引物(中科院上海細胞

3、生物所提供)序列為：57一ATG—CATTGGGGAACCCTGTGCGG一37；5’一TGAGGTCCAGCT—GCCACAGCATG一37，93℃變性lmin，56℃退火15min，72℃延伸2min，共32個循環(huán)。(4)電泳及內(nèi)參照定量：于2％瓊脂糖凝膠電泳、溴化乙錠染色后觀察PCR擴增產(chǎn)物，用。IDK一1型成像系統(tǒng)計算leptintuRNA的相對含量。3、統(tǒng)計方法：本研究采用t檢驗和直線相關(guān)分析。結(jié)果1、不同體重兒臍血lepti