霍亂腸毒素B亞單位在轉基因番茄植物中表達的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該論文研究的目的是利用轉基因植物的技術,獲得能正確表達霍亂腸毒素B亞單位(CTB)的番茄,并希望制成在生食后能刺激粘膜免疫系統(tǒng)產(chǎn)生保護性抗體的疫苗.我們設計將霍亂腸毒素B亞單位(CT-B)基因轉入番茄(L.esculentum,金豐一號)中表達,通過大量預試驗建立了有效的番茄外源基因轉化系統(tǒng),并成功將CT-B基因轉入番茄細胞中,獲得了轉基因植株,ELISA檢測和Western雜交試驗的結果表明CT-B基因在番茄中獲得表達.高效的再生及轉

2、化系統(tǒng)是外源目的基因導入植物的前提,該研究采用葉盤法,需要考慮外植體的來源及種類、供體菌株、培養(yǎng)篩選條件等因素.對13株抗性植株提取基因組DNA,采用PCR和Southern雜交試驗的方法,證實10株顯示CT-B基因整合到番茄基因組DNA中.對植物表達抗原基因CT-B的應用前景及在植物中表達所存在的問題進行了詳細的討論.在試驗過程中,對一些分子生物學試驗方法進行了改進,如提高PCR產(chǎn)物亞克隆效率方法,根癌農桿菌中重組質粒的提取及酶切證實

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