南方根結(jié)線蟲(chóng)對(duì)噻唑膦的抗藥性分析及其抗性治理策略初探.pdf

1、溫室大棚在連續(xù)多年采用噻唑膦等有機(jī)磷類(lèi)殺線蟲(chóng)劑防治根結(jié)線蟲(chóng)（Meloidogyne incognita）后，使根結(jié)線蟲(chóng)在一定程度上對(duì)噻唑膦產(chǎn)生了抗藥性。本研究通過(guò) RT-PCR技術(shù)、酶活性測(cè)定、體外RNAi介導(dǎo)的功能鑒定等方法，明確了南方根結(jié)線蟲(chóng)對(duì)噻唑膦的抗性水平及抗性種群乙酰膽堿酯酶基因?qū)︵珈⒖顾幮缘淖饔?，揭示了南方根結(jié)線蟲(chóng)對(duì)有機(jī)磷類(lèi)殺線蟲(chóng)劑產(chǎn)生抗藥性的機(jī)理，并對(duì)抗性治理策略進(jìn)行了初步探究。
　　酶活性測(cè)定和考馬斯亮藍(lán)染色法進(jìn)行

2、抗性和敏感種群蛋白含量和AChE比活力的測(cè)定和比較，發(fā)現(xiàn)敏感種群AChE比活力顯著高于抗性種群；抗性和敏感種群AChE對(duì)噻唑膦的敏感性測(cè)定結(jié)果顯示，抗性種群較敏感種群對(duì)噻唑膦更不敏感；利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增了南方根結(jié)線蟲(chóng)抗性和敏感種群AChE基因Mi-ace-1（登錄號(hào)KU366258）和Mi-ace-2（登錄號(hào)KU366259），同時(shí)在抗性種群中擴(kuò)增到了與 Mi-ace-2基因序列不同的差異序列 Mi-ace-2a（KU360593

3、），序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)Mi-ace-2和Mi-ace-2a核苷酸序列的差異有68處，氨基酸序列的差異有18處；利用體外RNAi技術(shù)沉默抗性種群Mi-ace-2基因，沉默后抗性種群對(duì)噻唑膦的敏感性以及線蟲(chóng)總AChE對(duì)噻唑膦的敏感性提高，推測(cè)Mi-ace-2在南方根結(jié)線蟲(chóng)抗藥性方面起著重要作用。
　　抗性治理策略探究主要圍繞生物防治及農(nóng)業(yè)防治兩個(gè)方面。生物防治測(cè)試了總狀共頭霉、淡紫擬青霉和蠟狀芽孢桿菌三種生防微生物及其兩兩組合對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)

4、卵孵化的抑制、幼蟲(chóng)毒力以及盆栽和溫室小區(qū)試驗(yàn)對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的防治效果，結(jié)果表明：三種生防微生物都有抑制卵孵化和殺線活性，抑制卵孵化效果最好的是50％總狀共頭霉和50%淡紫擬青霉，殺線活性最高的是50%總狀共頭霉，總狀共頭霉和淡紫擬青霉聯(lián)合施用顯著促進(jìn)了黃瓜根長(zhǎng)、莖長(zhǎng)和植株重量，顯著減少了線蟲(chóng)和根結(jié)數(shù)量，降低了線蟲(chóng)危害，增加了黃瓜產(chǎn)量，是保護(hù)性農(nóng)田系統(tǒng)中防治植物寄生線蟲(chóng)的新的生物防治措施。農(nóng)業(yè)防治對(duì)淺耕、深耕、淺耕＋棉隆、深耕＋棉隆4種土

5、壤連作障礙處理耕作機(jī)械化技術(shù)防治南方根結(jié)線蟲(chóng)的效果及對(duì)土壤微量元素的影響進(jìn)行了評(píng)價(jià)，試驗(yàn)結(jié)果表明：4種處理均能顯著降低土壤中南方根結(jié)線蟲(chóng)的數(shù)量，提高對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的防治效果，增加西瓜的產(chǎn)量，其中，以深耕+棉隆處理的防治效果和增產(chǎn)效果最好，同時(shí)還增加了交換性鎂和有效硒的含量。綜合評(píng)價(jià)認(rèn)為深耕+棉隆處理適于在南方根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)生非常嚴(yán)重的地區(qū)推廣應(yīng)用，而對(duì)于根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)生特別輕的地區(qū)，僅以淺耕處理就能有效控制其危害。
　　綜上所述，本研究初步明