南方根結(jié)線蟲對噻唑膦的抗藥性分析及其抗性治理策略初探.pdf

1、溫室大棚在連續(xù)多年采用噻唑膦等有機磷類殺線蟲劑防治根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita）后，使根結(jié)線蟲在一定程度上對噻唑膦產(chǎn)生了抗藥性。本研究通過 RT-PCR技術、酶活性測定、體外RNAi介導的功能鑒定等方法，明確了南方根結(jié)線蟲對噻唑膦的抗性水平及抗性種群乙酰膽堿酯酶基因?qū)︵珈⒖顾幮缘淖饔茫沂玖四戏礁Y(jié)線蟲對有機磷類殺線蟲劑產(chǎn)生抗藥性的機理，并對抗性治理策略進行了初步探究。
　　酶活性測定和考馬斯亮藍染色法進行

2、抗性和敏感種群蛋白含量和AChE比活力的測定和比較，發(fā)現(xiàn)敏感種群AChE比活力顯著高于抗性種群；抗性和敏感種群AChE對噻唑膦的敏感性測定結(jié)果顯示，抗性種群較敏感種群對噻唑膦更不敏感；利用RT-PCR技術擴增了南方根結(jié)線蟲抗性和敏感種群AChE基因Mi-ace-1（登錄號KU366258）和Mi-ace-2（登錄號KU366259），同時在抗性種群中擴增到了與 Mi-ace-2基因序列不同的差異序列 Mi-ace-2a（KU360593

3、），序列比對發(fā)現(xiàn)Mi-ace-2和Mi-ace-2a核苷酸序列的差異有68處，氨基酸序列的差異有18處；利用體外RNAi技術沉默抗性種群Mi-ace-2基因，沉默后抗性種群對噻唑膦的敏感性以及線蟲總AChE對噻唑膦的敏感性提高，推測Mi-ace-2在南方根結(jié)線蟲抗藥性方面起著重要作用。
　　抗性治理策略探究主要圍繞生物防治及農(nóng)業(yè)防治兩個方面。生物防治測試了總狀共頭霉、淡紫擬青霉和蠟狀芽孢桿菌三種生防微生物及其兩兩組合對南方根結(jié)線蟲

4、卵孵化的抑制、幼蟲毒力以及盆栽和溫室小區(qū)試驗對南方根結(jié)線蟲的防治效果，結(jié)果表明：三種生防微生物都有抑制卵孵化和殺線活性，抑制卵孵化效果最好的是50％總狀共頭霉和50%淡紫擬青霉，殺線活性最高的是50%總狀共頭霉，總狀共頭霉和淡紫擬青霉聯(lián)合施用顯著促進了黃瓜根長、莖長和植株重量，顯著減少了線蟲和根結(jié)數(shù)量，降低了線蟲危害，增加了黃瓜產(chǎn)量，是保護性農(nóng)田系統(tǒng)中防治植物寄生線蟲的新的生物防治措施。農(nóng)業(yè)防治對淺耕、深耕、淺耕＋棉隆、深耕＋棉隆4種土

5、壤連作障礙處理耕作機械化技術防治南方根結(jié)線蟲的效果及對土壤微量元素的影響進行了評價，試驗結(jié)果表明：4種處理均能顯著降低土壤中南方根結(jié)線蟲的數(shù)量，提高對根結(jié)線蟲的防治效果，增加西瓜的產(chǎn)量，其中，以深耕+棉隆處理的防治效果和增產(chǎn)效果最好，同時還增加了交換性鎂和有效硒的含量。綜合評價認為深耕+棉隆處理適于在南方根結(jié)線蟲發(fā)生非常嚴重的地區(qū)推廣應用，而對于根結(jié)線蟲發(fā)生特別輕的地區(qū)，僅以淺耕處理就能有效控制其危害。
　　綜上所述，本研究初步明