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1、目的:研究大腸桿菌刺激小鼠DC細(xì)胞對(duì)其表面分子CD40、B7-1、B7-2表達(dá)的影響。
方法:1、用不同濃度(2×107、2×106)大腸桿菌刺激小鼠DC細(xì)胞(DC2.4,2×105個(gè)/孔),LPS處理組作為陽(yáng)性對(duì)照,PBS處理組作為陰性對(duì)照,在刺激4h及24h后收集細(xì)胞,提取RNA,采用RT-PCR法檢測(cè)DC細(xì)胞CD40 mRNA的表達(dá)。2、擴(kuò)大培養(yǎng)(DC細(xì)胞為1×106個(gè)/孔,大腸桿菌及LPS亦相應(yīng)擴(kuò)大5倍),感染4h
2、及24h后收集細(xì)胞,用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其細(xì)胞表面分子CD40、B7-1、B7-2的表達(dá)。
結(jié)果:1、與陰性對(duì)照組比較,小鼠DC細(xì)胞在大腸桿菌刺激后,其表面CD40分子顯著增加,兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。其中,刺激4h增加水平低于刺激24h[(6714.5±1367.74)copies/μ1 vs(13105.0±801.06)copies/μ1;(10101.0±797.69)copies/μ1 vs(1578
3、5.0±676.23)copies/μ1],兩組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01、),較低濃度(1×107)刺激增加水平高于較高濃度刺激(1×108)[(10101.0±797.69)copies/μ1 vs(6714.5±1367.74)copies/μ1;(15785.0±676.23)copies/μ1 vs(13105.0±801.06)copies/μ1],兩組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)。2、用大腸桿菌刺激小鼠
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