烏司他丁對大鼠腎缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的:該研究應(yīng)用夾閉大鼠雙側(cè)腎蒂造成腎缺血再灌注損傷模型,通過檢測缺血后血腎功能;結(jié)合常規(guī)病理檢查,以及應(yīng)用免疫組化方法進行腎組織標本bcl-2和HSP 70檢測,并行透射電鏡檢查腎組織超微結(jié)構(gòu),來探討烏司他丁對腎缺血再灌注損傷的保護作用及作用機理.方法:一、實驗動物與試劑健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠,體重210-250g,共75只,由浙江省醫(yī)科院動物中心提供,鼠抗bcl-2單克隆抗體及鼠抗HSP單克隆抗體均購于福州邁新

2、生物工程有限公司.烏司他丁由廣東天普生化醫(yī)藥股份有限公司提供.二、動物實驗1、動物分組.2、動物模型的制作.三、觀察指標1、腎功能檢查用酶法測再灌注各時點血BUN、Cr.2、HE染色福爾馬林液固定左腎組織,常規(guī)石蠟切片,作HE染色,在HB-2型Olympus光學(xué)顯微鏡下觀察其組織學(xué)改變.按paller標準評分.3、Bcl-2和HSP70免疫組化檢測.4、透射電鏡檢測2.5﹪戊二醛磷酸緩沖液固定左腎組織、按透射電鏡標本制作常規(guī),經(jīng)漂洗,固

3、定,再漂洗、脫水、浸透、包埋、聚合、切片、染色等步驟,在TECNAL-10型菲利浦電鏡下觀察其超微結(jié)構(gòu)改變.四、統(tǒng)計方法結(jié)果以均數(shù)±標準表示,所有數(shù)據(jù)均在PIV微機上用spss11.0統(tǒng)計軟件包完成.采用方法:計量資料采用方差分析;等級資料先H檢驗后再Nemenyi法,P值小于0.05定為統(tǒng)計學(xué)有顯著差異.結(jié)論:一、烏司他丁可降低大鼠缺血再灌注后血肌酐,尿素氮數(shù)值,改善腎功能,對大鼠缺血再灌注損傷有明顯保護作用.二、腎缺血再灌注損傷時烏