高山紅景天甙對(duì)阿霉素腎病大鼠腎小球硬化防治作用的研究.pdf

1、目的：腎小球疾病在發(fā)展至尿毒癥的過(guò)程中有一個(gè)共同點(diǎn)，即腎小球硬化。腎小球硬化的病理特征是進(jìn)行性細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)積聚，其結(jié)果是使腎小球正常結(jié)構(gòu)消失，導(dǎo)致腎單位破壞。 高山紅景天是一種生長(zhǎng)在世界高山高緯度地區(qū)的珍貴藥用植物，在我國(guó)主要分布在東北的長(zhǎng)白山區(qū)。由于其生長(zhǎng)環(huán)境極其惡劣，具有很強(qiáng)的生命力和特殊的適應(yīng)性。研究發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化作用、抗肝纖維化作用。最近的研究顯示其具有抗腎纖維化作用，對(duì)腎間質(zhì)損傷有保護(hù)作用。對(duì)于高山紅景天抗腎

2、纖維化減少細(xì)胞外基質(zhì)的積聚，防治腎小球硬化，其作用途徑的研究目前未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。 本研究通過(guò)建立阿霉素腎病大鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，從細(xì)胞外基質(zhì)降解的環(huán)節(jié)著手，引入東北長(zhǎng)白山地區(qū)特有中藥高山紅景天，作用于阿霉素腎病大鼠模型，觀(guān)察應(yīng)用紅景天甙治療和未用紅景天治療的腎炎大鼠模型腎臟組織病理學(xué)改變、腎小球細(xì)胞外基質(zhì)成分的含量的變化，以及腎組織及血清中PAI-1、TGF-β1、MMP-2、MMP-9含量變化與腎小球硬化纖維化之間的關(guān)系，揭示高山紅

3、景天防治腎小球硬化的機(jī)制，揭示其內(nèi)在變化規(guī)律，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：Wistar雌性大鼠30只，隨機(jī)分為三組(每組10只)，分別為正常對(duì)照組、腎炎模型組和腎炎模型加用高山紅景天甙干預(yù)組。以大劑量阿霉素沖擊誘導(dǎo)大鼠腎炎模型，留取第1周，2周，3周末24小時(shí)尿樣及血樣標(biāo)本，磺基水楊酸比濁法測(cè)定尿蛋白含量，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、膽固醇(TC)、甘油三酯(

4、TG)，光鏡觀(guān)察組織病理形態(tài)，免疫組化方法檢測(cè)細(xì)胞外基質(zhì)成分FN、LN的含量，雙抗體夾心ELISA方法檢測(cè)血清MMP-2、MMP-9、TGF-β1的含量，發(fā)色底物法檢測(cè)腎組織勻漿液PAI-1、MMP-2、MMP-9含量。 結(jié)果：第1周各組大鼠出現(xiàn)不同程度的蛋白尿，但各組間無(wú)明顯差異(P＞0.05)，第2周末模型組與對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01)，高山紅景天甙干預(yù)組與模型組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05)，第3周末模型組均明

5、顯高于對(duì)照組(P＜0.01)，高山紅景天甙干預(yù)組明顯低于模型組(P＜0.05)，提示高山紅景天甙可減少尿蛋白的丟失。第3周末模型組TP、Alb的含量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05，P＜0.01)，而TC、TG的含量均顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，高山紅景天甙干預(yù)組TP、Alb的含量均明顯高于模型組(P＜0.01)，而TC、TG的含量明顯低于模型組(P＜0.05)。第3周末模型組SCr、BUN的含量顯著高于對(duì)照組(P＜0.01，P＜0.0

6、5)；高山紅景天甙干預(yù)組與模型組比較，兩者的含量明顯下降(P＜0.01)。 光鏡觀(guān)察顯示，對(duì)照組腎小球及小管間質(zhì)結(jié)構(gòu)基本正常；模型組腎小球腫大，系膜區(qū)呈輕度增寬，系膜細(xì)胞增生，系膜基質(zhì)增多。病變腎小球周?chē)慕」苌掀ぜ?xì)胞變性腫脹，部分小管腔內(nèi)可見(jiàn)蛋白管型，間質(zhì)有灶狀纖維組織增生；高山紅景天甙干預(yù)組腎小球輕度腫脹，系膜區(qū)呈局灶節(jié)段性輕度增寬，系膜細(xì)胞及系膜基質(zhì)增生程度較模型組輕，病變腎小球周?chē)鷥H有少數(shù)近曲小管上皮細(xì)胞變性，間質(zhì)纖

7、維組織增生及炎細(xì)胞浸潤(rùn)少見(jiàn)。 免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，正常對(duì)照組FN在腎小球中有少量表達(dá)，主要分布于系膜區(qū)，基底膜上著色較淺；在腎小管基底膜有極少量沉積。而LN在腎小球中表達(dá)明顯，主要分布于基底膜、系膜區(qū)和鮑曼氏囊；在腎小管中有少量表達(dá)，分布于基底膜，間質(zhì)中無(wú)明顯表達(dá)。計(jì)算機(jī)圖像半定量分析表明，模型組FN、LN在腎小球及小管中分布的范圍和強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，其相對(duì)含量明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)；高山紅景天甙干預(yù)組與模型組相比，其表達(dá)

8、顯著下降(P＜0.01)，提示高山紅景天甙可抑制阿霉素腎病大鼠細(xì)胞外基質(zhì)中FN、LN的過(guò)度表達(dá)。 與對(duì)照組比較，大鼠外周血MMP-2、MMP-9水平在模型組均不同程度增加(P＜0.05，P＜0.01)，應(yīng)用高山紅景天甙干預(yù)后，與模型組比較變化不顯著(P＞0.05)。模型組外周血TGF-β1水平明顯高于對(duì)照組，高山紅景天甙干預(yù)后其水平明顯下降(P＜0.05)；腎組織PAI-1水平，模型組與對(duì)照組比較明顯增高(P＜0.05)，高山紅

9、景天甙干預(yù)組與模型組比較明顯下降(P＜0.05)。大鼠腎組織MMP-2、MMP-9水平，模型組與對(duì)照組比較有不同程度增加，經(jīng)過(guò)高山紅景天甙治療后均明顯上調(diào)(P＜0.05)。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，高山紅景天甙能夠有效地降低阿霉素腎病大鼠尿蛋白，提高血漿蛋白，改善脂質(zhì)代謝；高山紅景天甙能夠抑制FN、LN的表達(dá)，抑制阿霉素腎病大鼠ECM的合成，減少ECM在腎小球和腎小管中的積聚，促進(jìn)腎臟病理?yè)p害的修復(fù)；高山紅景天甙通過(guò)降低外周血TG