沉默ARTN基因對胃癌細胞生物學特性的影響及ARTN與胃癌臨床病理特征之間的關系.pdf

1、目的:
　　研究沉默ARTN基因對胃癌細胞增殖、侵襲、轉移等生物學特性的作用，并探索其具體的機制，以及檢測胃癌組織中ARTN基因的表達，結合患者的臨床病理特征，確定ARTN基因與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關系。
　　方法:
　　使用Western Blot方法檢測胃癌細胞株SGC7901、MGC803、BGC823中ARTN基因的表達量，篩選出ARTN基因表達量最高的一株細胞，合成ARTN基因的干擾RNA（1808，1383，1

2、604三組），并利用基因轉染技術將三組干擾RNA分別轉染進該胃癌細胞株，并用流式細胞儀觀察轉染效率，分別用實時熒光定量PCR和Western Blot方法檢測基因干擾后的ARTN mRNA和蛋白的表達，選出沉默效率最高的那一組干擾RNA序列。沉默ARTN基因后，使用CCK-8的方法檢測細胞增殖活性，采用Transwell小室方法分別檢測細胞遷移能力及侵襲能力，分別用實時熒光定量PCR和Western Blot方法檢測細胞ARTN基因轉染

3、前后胃癌相關基因（P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2）在RNA水平和蛋白水平上的表達變化。另外用免疫組化和Western Blot分別檢測胃癌組織和正常胃粘膜的ARTN表達。
　　結果:
　　MGC803中ARTN基因的表達量最高，干擾RNA序列1383組的沉默效率最高，轉染干擾序列后， ARTN基因在 RNA水平和蛋白水平的表達明顯下降，胃癌細胞MGC803在干擾ARTN基因后，細胞增殖能力、遷移能力和侵

4、襲能力均明顯下降，胃癌細胞中P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2在RNA水平和蛋白水平表達均下調(diào)。胃癌組織中的ARTN表達明顯高于正常胃粘膜。
　　結論:
　　ARTN基因可以增強胃癌細胞的增殖能力、遷移能力、侵襲能力，沉默ARTN基因可以下調(diào)胃癌增殖、轉移和侵襲相關基因的表達。ARTN與胃癌的分化程度、浸潤深度、轉移及TNM分期有關，檢測ARTN的表達可以用來評估胃癌的臨床分期和指導其治療，對胃癌的發(fā)生發(fā)展