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1、目的:Src是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的有內(nèi)在的酪氨酸激酶活性的人類(lèi)癌基因,其在臨床的應(yīng)用價(jià)值受到廣泛的關(guān)注,本實(shí)驗(yàn)探討Src抑制劑pp2對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移、侵襲和誘導(dǎo)血管生成能力等生物學(xué)行為的影響。
方法:通過(guò)免疫組織化學(xué)檢測(cè)人胃癌SGC-7901細(xì)胞Src和p-Src蛋白的表達(dá);western blot檢測(cè)pp2對(duì)p-src蛋白表達(dá)的影響;MTT檢測(cè)pp2對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖的影響;劃痕實(shí)驗(yàn)和tra
2、nswell小室試驗(yàn)觀察抑制劑pp2對(duì)胃癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響;體外誘導(dǎo)血管生成分析實(shí)驗(yàn)觀察pp2對(duì)胃癌細(xì)胞體外誘導(dǎo)血管形成的影響。
結(jié)果:免疫組織化學(xué)顯示人胃癌SGC-7901細(xì)胞均有Src和P-Src蛋白的表達(dá),且定位于細(xì)胞胞漿;western blot顯示5μmol/L pp2對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞P-Src蛋白的表達(dá)有明顯的抑制作用;MTT檢測(cè)結(jié)果表明,Oμmol/L(0.33±0.22)、5μmol/L
3、(0.33±0.21)和10μmol/L(0.33±1.02)pp2作用人胃癌SGC-7901細(xì)胞12h對(duì)細(xì)胞增殖沒(méi)有影響(P>0.05),而15μmol/L(3.63±1.02)pp2作用人胃癌SGC-7901細(xì)胞12h抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖(P<0.05);劃痕損傷實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)5μmol/L pp2[(2.54±0.16)μm]和10μmol/L pp2[(1.56±0.12)μm]組較對(duì)照組[(3.92±0.13)μm]均
4、能明顯抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞遷移能力(P<0.05),且呈濃度依賴性,抑制能力隨濃度的增加而逐漸增強(qiáng);transwell小室實(shí)驗(yàn)表明,穿過(guò)小室的細(xì)胞數(shù),5μmol/L pp2組(321.67±28.39)和10μmol/L pp2組(256.00±29.84)與對(duì)照組(496.67±34.64)相比均能抑制人胃癌細(xì)胞侵襲能力(P<0.05),濃度越大抑制能力越強(qiáng);體外誘導(dǎo)血管生成分析實(shí)驗(yàn)顯示,形成的管腔數(shù),5μmol/L pp2
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