大鼠丘腦前核內(nèi)蛋白激酶A催化亞基β在學(xué)習(xí)記憶中的表達(dá).pdf

1、目的:丘腦前核(anterior thalamic nuclei，ATN)是位于間腦背側(cè)丘腦前部的重要聯(lián)絡(luò)性核團(tuán)，是Papez回路的重要組成部分，由三個(gè)亞核組成，分別為丘腦前核背側(cè)核(AD)，丘腦前核腹側(cè)核(AV)及丘腦前核內(nèi)側(cè)核(AM)。已有實(shí)驗(yàn)證明丘腦前核背側(cè)核及丘腦前核腹側(cè)核在學(xué)習(xí)記憶過(guò)程中同樣發(fā)揮積極作用，但對(duì)于其參與學(xué)習(xí)記憶機(jī)制的研究還很少。本研究旨在通過(guò)應(yīng)用免疫組化技術(shù)觀察Morris水迷宮訓(xùn)練建模成功大鼠的丘腦前核蛋白激酶

2、A催化亞基β(PKA-Cβ)的表達(dá)探討其在丘腦前核學(xué)習(xí)記憶中的可能作用，進(jìn)一步揭示丘腦前核在學(xué)習(xí)記憶中從發(fā)揮作用的相關(guān)分子機(jī)制。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)采用30只成年雄性Wistar大鼠，體重200-250g，隨即分配至實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組經(jīng)5天Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)建模形成空間記憶，對(duì)照組單純給予相同條件的環(huán)境刺激但不給予學(xué)習(xí)記憶訓(xùn)練。于第5天空間探索試驗(yàn)后兩小時(shí)內(nèi)行4％多聚甲醛心臟灌流，固定，取腦，4℃過(guò)夜。次日用免疫組織化學(xué)染色

3、(immunohistochemistry，IHC)方法觀察大鼠丘腦前核內(nèi)蛋白激酶A催化亞基β的表達(dá)及分布情況，顯微拍照并行圖片分析。Morris水迷宮行為學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及照片分析數(shù)據(jù)均使用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:Morris水迷宮行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)組大鼠第三天和第五天的獲得性訓(xùn)練試驗(yàn)及第六天的空間探索實(shí)驗(yàn)的逃避潛伏期行數(shù)據(jù)分析，發(fā)現(xiàn)第五天與第三天的逃避潛伏期相比明顯縮短(P＜

4、0.05)，第五天與第六天的逃避潛伏期間沒(méi)有顯著差異。免疫組化染色中，光鏡下可見(jiàn)蛋白激酶A催化亞基β在實(shí)驗(yàn)組大鼠丘腦前核內(nèi)的細(xì)胞核及神經(jīng)纖維中較清晰的表達(dá)。通過(guò)對(duì)陽(yáng)性表達(dá)產(chǎn)物的平均光密度值分析，實(shí)驗(yàn)組表達(dá)強(qiáng)于對(duì)照組，有顯著差異(P＜0.05);實(shí)驗(yàn)組AD區(qū)表達(dá)弱于AV區(qū)，有顯著差異(P＜0.05);對(duì)照組AD區(qū)與AV區(qū)差異不顯著(P＞0.05)。
　　結(jié)論:在學(xué)習(xí)記憶過(guò)程中大鼠丘腦前核內(nèi)蛋白激酶A催化亞基β的表達(dá)增加，提示丘腦前核