2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的: (1)觀察低O2高CO2對小鼠血腦屏障(BBB)通透性的影響; (2)觀察低O2高CO2下小鼠BBB超微結(jié)構(gòu)的變化; (3)檢測低O2高CO2對小鼠水通道蛋白-4(AQP4)基因及蛋白表達(dá)的影響; (4)探討AQP4表達(dá)變化與BBB損害的關(guān)系; (5)探討低O2高CO2下小鼠BBB的損害是否與認(rèn)知功能的變化有關(guān)。 方法: 雄性成年C57BL/6小鼠,SPF級,隨機分為正常對

2、照組(NC組)、低O2高CO21天、2天、3天、1周、2周組(HH1d、1d、2d、3d、1w、2w組)將后5組小鼠置于常壓低O2高CO2艙內(nèi),通過N2和CO2調(diào)節(jié)降低艙內(nèi)O2濃度使其維持在9~11%,CO2濃度為5.5~6.5%,每天8小時。對照組大鼠除吸入空氣外,其它條件與后5組相同。NC組及HH各組小鼠(n=6)出艙后腹腔注射熒光素鈉(NaFI,分子量376D),水合氯醛麻醉,生理鹽水(NS)灌注取腦,勻漿取上清,熒光分光光度計分

3、析腦組織與血清NaFI含量比值,觀察不同時間點小鼠BBB通透性的變化;取NC組與HH1d與2w組小鼠皮層(n=4),電鏡觀察小鼠BBB超微結(jié)構(gòu)的變化,并硝酸鑭電鏡示蹤血腦屏障通透性的改變;NC組與HH1d組小鼠大腦分別做冠狀位切片(n=6)及分離皮層和海馬(n=6),免疫組化及RT-PCR法分別檢測AQP4蛋白及mRNA表達(dá)的變化。 結(jié)果: (1)熒光分光光度計分析腦組織NaFI透過率顯示:與NC組(6.45%±8.39

4、%)相比,HH1d組(55.30%±12.41%)小鼠血腦屏障的通透性升高最明顯,然后逐漸下降(HH2d組為42.82%±10.06%,HH3d組為39.24%±8.20%),NaFI在1w(19.08%±6.01%)內(nèi)仍顯著高于NC組(P<0.05或P<0.01),2w(7.30%±7.09%)末回落至對照組水平(P>0.05); (2)電鏡觀察BBB超微結(jié)構(gòu)示:NC組小鼠BBB血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整光滑,內(nèi)皮細(xì)胞外基膜連續(xù),血

5、管內(nèi)皮間連接緊密,周圍腦組織未見病理改變。HH1d組小鼠大腦皮質(zhì)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞吞飲泡增多,基底膜疏松密度不均,緊密連接(TJ)松弛,膠質(zhì)細(xì)胞足突腫脹,周圍神經(jīng)纖維部分腫脹。HH2w組小鼠電鏡BBB超微結(jié)構(gòu)恢復(fù)正常; (3)硝酸鑭示蹤可見:NC組鑭顆粒存留于毛細(xì)血管腔內(nèi)皮細(xì)胞表面,HH1d組鑭顆粒透過小鼠腦組織毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞TJ間隙、基膜下及部分基底膜外周圍組織間隙,HH2w組未見鑭顆粒透過毛細(xì)血管管腔; (4)免疫組

6、化檢測AQP4蛋白結(jié)果顯示:AQP4蛋白主要在小鼠腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞與星形膠質(zhì)細(xì)胞足突接觸處呈陽性表達(dá),與NC組皮層(0.037±0.003)及海馬(0.038±0.005)相比,HH1d組AQP4蛋白于皮層(0.041±0.003)及海馬(0.044±0.002)陽性表達(dá)增多,染色增強(P<0.05); (5) RT-PCR檢測AQP4mRNA結(jié)果顯示:HH1d組小鼠AQP4mRNA在海馬及皮層表達(dá)水平[分別為(0.879±0

7、.202),(0.862±0.182)]均比NC組[分別為(0.601±0.161),(0.562±0.246)]明顯增高(P<0.05)。 結(jié)論: (1)間斷低O2高CO2在早期能明顯增高小鼠BBB的通透性,隨著時間的延長,血腦屏障的高通透性漸趨恢復(fù); (2)急性低O2高CO2使星形膠質(zhì)細(xì)胞足突腫脹及血管內(nèi)皮TJ破壞,形成腦水腫; (3)急性低O2高CO2誘導(dǎo)小鼠皮層及海馬腦組織AQP4表達(dá)增高,其增高

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