慢性低O-,2-高CO-,2-對(duì)大鼠腦細(xì)胞凋亡及Bcl-2、Bax基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討慢性低02高C02對(duì)大鼠皮層和海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的誘發(fā)作用及對(duì)Bcl-2、Bax基因表達(dá)的影響。 方法：將清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠50只，體重180-220g，隨機(jī)分成5組：即正常對(duì)照組(NC，n=10)、低02高(2021周組(1HH，n=lO)、低02高C022周組(2HH，n=10)、低02高CO23周組(3HH，n=10)和低O2高COd周組(4HH，n=10)。將后4組大鼠置于常壓低0

2、2高C02艙內(nèi)，通過(guò)N2調(diào)節(jié)降低艙內(nèi)02：濃度使其維持在9％-11％，C02濃度為5．5％一6．5％，每天8小時(shí)，每周6天。對(duì)照組大鼠除吸入空氣外，其它條件與后4組相同。動(dòng)物飼養(yǎng)到規(guī)定時(shí)間后，用戊巴比妥鈉(35mg／kg體重)腹腔麻醉，(1)采用右心導(dǎo)管法測(cè)量平均肺動(dòng)脈壓力(mPAP)，左頸總動(dòng)脈插管測(cè)平均頸動(dòng)脈壓力(mCAP)，分別稱取右心室游離壁(RV)和左心室加室間隔(LV+S)的重量，以RV／(LV+S)的重量比，作為右室肥大的

3、指標(biāo)。(2)采用原位末端標(biāo)記法(Tunel法)檢測(cè)皮層和海馬區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)。(3)PT-PCR方法檢測(cè)皮層和海馬區(qū)Bcl一2和BaxmRNA的表達(dá)。(4)電鏡下觀察皮層和海馬區(qū)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果： (1)低O2高CO2各組mPAP和RV／(LV+S)均高于正常對(duì)照組(均P<0．01)；mPAP和RV／(LV+S)在低02高C022周時(shí)達(dá)最高，3—4周漸趨穩(wěn)定。各組間mCAP無(wú)顯著性差異(均P＞0.05)

4、。 (2)TUNEL染色發(fā)現(xiàn)，低02高C02各組皮層和海馬AI均明顯高于正常對(duì)照組(均P(O．01)；正常對(duì)照組皮層和海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡少見(jiàn)。 (3)RT-PCR檢測(cè)顯示，低02高C02各組皮層及海馬區(qū)Bcl一2和BaxmRNA表達(dá)較正常對(duì)照組明顯上調(diào)(均／KO．01)。隨著低02高C02時(shí)間延長(zhǎng)，BaxmRNA表達(dá)逐漸增加；Bcl-2mP,NA表達(dá)則先升高而后下降；Bcl-2／Bax比值的變化趨勢(shì)同Bcl-2。

5、(4)透射電鏡檢查發(fā)現(xiàn)，1HH組皮層及海馬神經(jīng)元無(wú)明顯改變，2HH、3HH及4HH組皮層和海馬出現(xiàn)神經(jīng)元凋亡和變性，且隨著低02高C02時(shí)間延長(zhǎng)改變?cè)矫黠@。 (5)Pearman相關(guān)分析顯示，皮層和海馬區(qū)凋亡指數(shù)(AI)與BaxmRNA表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(／KO．01)，與色c1-2／Bax比值呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(／2<0．01)。 結(jié)論： (1)慢性低02高C02可以誘發(fā)大鼠皮層和海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡，且隨著低02高C02