納米級與微米級二氧化硅粉體對大鼠急性肺毒性的比較研究.pdf

1、本研究選取了二氧化硅納米及其微米級粉體作為實(shí)驗(yàn)材料，從支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞和標(biāo)志酶活性及組織病理學(xué)等幾方面，比較吸入納米二氧化硅及其微米粉體對大鼠急性肺毒性的影響，并探討其作用機(jī)制。 材料與方法： 一、動物分組及染塵健康雄性Wistar大鼠150只，體重180-220g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1w，按體重隨機(jī)分為5組：空白對照組、納米SiO<,2>、微米SiO<,2>分別設(shè)100、300mg/m<'3>劑量組，每組30只動物。有機(jī)

2、玻璃染塵柜體積為100L，靜式呼吸道吸入染毒2h，于1次染塵后，在6h、12h、24h、48h、72h各個時點(diǎn)，分別從各劑量組中隨機(jī)選取6只實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 二、觀察指標(biāo)及檢測方法 1、支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞成分檢測 (1)細(xì)胞總數(shù)計數(shù)：紅細(xì)胞計數(shù)法。 (2)細(xì)胞分類計數(shù)：吉姆薩染色j鏡檢。 2、支氣管肺泡灌洗液中生化成分檢測 (1)蛋白含量測定：考馬斯亮蘭比色法測定。 (2)L

3、DH活性測定：2，4-二硝基苯肼比色法測定。 (3)AKP活性測定：氨基安替比林比色法測定。 以上試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。 3、肺臟組織病理學(xué)檢測肺臟經(jīng)10％多聚甲醛固定，石蠟包埋，切片厚度5um，常規(guī)蘇木素．伊紅(HE)染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。 4、數(shù)據(jù)處理 用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對各項指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，所有結(jié)果用均值x±s表示，正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計處理；非

4、正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計分析，P<0.05作為顯著性水平。 結(jié)論： 在本實(shí)驗(yàn)條件下，納米SiO<,2與微米SiO<,2>粉體均對肺臟存在急性損害作用，納米SiO<,2>與微米SiO<,2>兩者所致的急性>肺毒性存在差異： 1、納米SiO<,2>與微米SiO<,2>粉體均可在染塵后6小時引起B(yǎng)ALF中細(xì)胞總數(shù)明顯升高，在6、24小時100mg/m<'3>劑量水平上納米SiO<,2>致細(xì)胞總數(shù)升高程度高于微

5、米SiO<,2>。 2、納米SiO<,2>粉體引起以中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的急性炎癥反應(yīng)，而微米SiO<,2>幾乎無此作用。 3、納米SiO<,2>與微米SiO<,2>粉體均可引起B(yǎng)ALF中蛋白含量的升高，在48小時納米SiO<,2>組總蛋白含量升高程度高于微米SiO<,2>。 4、納米SiO<,2>粉體在染塵后24、72小時100mg/m<'3>；6、24小時300mg/m<'3>劑量水平上引起。BALF中L