瀕危植物桃兒七化學成分及其資源研究.pdf

1、桃兒七(Sinopodophyllum hexandrum(Royle)Ying)是小檗科(Berberidaceae)鬼臼亞科(Podophylloideae)桃兒七屬多年生草本植物，其根和根莖中含有大量的鬼臼毒素及其衍生物，其中鬼臼毒素(podophyllotoxin)具有很高的抗癌活性，是近年來合成抗癌藥物VP-16(etoposide)和VM-26(teniposide)等的前體物質。
　　 目前，已發(fā)現桃兒七的根及根莖

2、中主要含有木脂素類、黃酮類、皂苷、多糖及鞣質等化學成分。其中木脂素類成分主要為鬼臼毒素、去甲鬼臼毒素、鬼臼苦素、去氫鬼臼毒素、鬼臼毒酮、盾葉鬼臼毒素，鬼臼毒素苷、4'-去甲鬼臼毒素苷、盾葉鬼臼毒素苷、4'-去甲鬼臼毒酮、山荷葉素等。黃酮類成分主要為槲皮素和山柰酚及其苷類等。
　　 本課題選取瀕危植物桃兒七為研究對象，從藥物化學的角度出發(fā)，測定不同產地桃兒七不同部位中主要成分鬼臼毒素的含量，利用高效液相色譜-質譜(HPLC-ESI

3、-MS)連用技術分析鑒定各產地桃兒七中的主要化學成分，在此基礎上，建立桃兒七HPLC指紋圖譜，探討各產地品種間主要化學成分之間的變化，分析各生長地桃兒七主要化學成分間的相似性及差異程度，為建立桃兒七中藥資源綜合評價體系和中藥材質量控制體系建立科學依據。
　　 ⑴采集了6個產地野生桃兒七樣品，在參考已有文獻的基礎上，篩選合適的色譜分析條件，建立其根及莖的HPLC色譜圖。同時以鬼臼毒素為指標，通過外標法分別測定不同產地桃兒七根和莖中

4、鬼臼毒素的含量，結果表明其根中含量在4.512-9.834‰之間，莖中含量在1.218-7.770‰之間。不同生長地中以寧夏六盤山桃兒七的根中鬼臼毒素含量最高，其次是甘肅興隆山、四川榆林鄉(xiāng)和甘肅插崗、四川刷經寺等地區(qū)，而云南納帕海地區(qū)的桃兒七根中鬼臼毒素含量最低。云南納帕海桃兒七的莖中鬼臼毒素含量最高，其次是四川榆林鄉(xiāng)、甘肅興隆山，而四川刷經寺最低。
　　 ⑵篩選適當提取方法，采用Diamonsil C18色譜柱，0.04％甲酸

5、水-乙腈梯度洗脫，流速0.5 ml·min-1，檢測波長290nm，柱溫30℃條件下，記錄液相色圖譜。建立了不同生長地桃兒七的HPLC指紋圖譜，并進行相似度比較；對其中的鬼臼毒素進行了歸屬，同時以其為內參比物，計算了指紋圖譜中共有峰的相對含量。
　　 ⑶采用高效液相色譜與電噴霧質譜法(HPLC-ESI-MS)，篩選適宜色譜質譜分析條件對桃兒七根的甲醇提取液進行研究。儀器采用LC-ESI-MS(Thermo Scientific，

6、USA)高效液相色譜-電噴霧-離子阱質譜儀，色譜柱Diamonsil C18(250×4.6mm，5μm)，流速：0.2 ml·min-1，流動相選擇乙腈(A)-0.02％乙酸水(B)，采用梯度程序洗脫，室溫，紫外檢測器檢測波長：290 nm，進樣量：10μL；ESI電離源為正離子模式，載氣為氮氣；電噴霧電壓ISpray Voltage(kV)：4.00；鞘氣流速Sheath Gas Flow Rate(arb)：30.00；輔助氣流速