瀕危植物桃兒七化學(xué)成分及其資源研究.pdf

1、桃兒七(Sinopodophyllum hexandrum(Royle)Ying)是小檗科(Berberidaceae)鬼臼亞科(Podophylloideae)桃兒七屬多年生草本植物，其根和根莖中含有大量的鬼臼毒素及其衍生物，其中鬼臼毒素(podophyllotoxin)具有很高的抗癌活性，是近年來(lái)合成抗癌藥物VP-16(etoposide)和VM-26(teniposide)等的前體物質(zhì)。
　　 目前，已發(fā)現(xiàn)桃兒七的根及根莖

2、中主要含有木脂素類、黃酮類、皂苷、多糖及鞣質(zhì)等化學(xué)成分。其中木脂素類成分主要為鬼臼毒素、去甲鬼臼毒素、鬼臼苦素、去氫鬼臼毒素、鬼臼毒酮、盾葉鬼臼毒素，鬼臼毒素苷、4'-去甲鬼臼毒素苷、盾葉鬼臼毒素苷、4'-去甲鬼臼毒酮、山荷葉素等。黃酮類成分主要為槲皮素和山柰酚及其苷類等。
　　 本課題選取瀕危植物桃兒七為研究對(duì)象，從藥物化學(xué)的角度出發(fā)，測(cè)定不同產(chǎn)地桃兒七不同部位中主要成分鬼臼毒素的含量，利用高效液相色譜-質(zhì)譜(HPLC-ESI

3、-MS)連用技術(shù)分析鑒定各產(chǎn)地桃兒七中的主要化學(xué)成分，在此基礎(chǔ)上，建立桃兒七HPLC指紋圖譜，探討各產(chǎn)地品種間主要化學(xué)成分之間的變化，分析各生長(zhǎng)地桃兒七主要化學(xué)成分間的相似性及差異程度，為建立桃兒七中藥資源綜合評(píng)價(jià)體系和中藥材質(zhì)量控制體系建立科學(xué)依據(jù)。
　　 ⑴采集了6個(gè)產(chǎn)地野生桃兒七樣品，在參考已有文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，篩選合適的色譜分析條件，建立其根及莖的HPLC色譜圖。同時(shí)以鬼臼毒素為指標(biāo)，通過(guò)外標(biāo)法分別測(cè)定不同產(chǎn)地桃兒七根和莖中

4、鬼臼毒素的含量，結(jié)果表明其根中含量在4.512-9.834‰之間，莖中含量在1.218-7.770‰之間。不同生長(zhǎng)地中以寧夏六盤山桃兒七的根中鬼臼毒素含量最高，其次是甘肅興隆山、四川榆林鄉(xiāng)和甘肅插崗、四川刷經(jīng)寺等地區(qū)，而云南納帕海地區(qū)的桃兒七根中鬼臼毒素含量最低。云南納帕海桃兒七的莖中鬼臼毒素含量最高，其次是四川榆林鄉(xiāng)、甘肅興隆山，而四川刷經(jīng)寺最低。
　　 ⑵篩選適當(dāng)提取方法，采用Diamonsil C18色譜柱，0.04％甲酸

5、水-乙腈梯度洗脫，流速0.5 ml·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)290nm，柱溫30℃條件下，記錄液相色圖譜。建立了不同生長(zhǎng)地桃兒七的HPLC指紋圖譜，并進(jìn)行相似度比較；對(duì)其中的鬼臼毒素進(jìn)行了歸屬，同時(shí)以其為內(nèi)參比物，計(jì)算了指紋圖譜中共有峰的相對(duì)含量。
　　 ⑶采用高效液相色譜與電噴霧質(zhì)譜法(HPLC-ESI-MS)，篩選適宜色譜質(zhì)譜分析條件對(duì)桃兒七根的甲醇提取液進(jìn)行研究。儀器采用LC-ESI-MS(Thermo Scientific，

6、USA)高效液相色譜-電噴霧-離子阱質(zhì)譜儀，色譜柱Diamonsil C18(250×4.6mm，5μm)，流速：0.2 ml·min-1，流動(dòng)相選擇乙腈(A)-0.02％乙酸水(B)，采用梯度程序洗脫，室溫，紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)：290 nm，進(jìn)樣量：10μL；ESI電離源為正離子模式，載氣為氮?dú)?；電噴霧電壓ISpray Voltage(kV)：4.00；鞘氣流速Sheath Gas Flow Rate(arb)：30.00；輔助氣流速