養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘臨床研究及對(duì)便秘模型小鼠結(jié)腸ICC的影響.pdf

1、便秘的危害是漸進(jìn)的，不易引起醫(yī)生及患者重視，但長期頑固性便秘對(duì)人體的危害是不容忽視的。人們普遍的慣性思維認(rèn)為便秘僅僅是大便干硬難出，事實(shí)上便秘與許多疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。隨著飲食結(jié)構(gòu)的改變及精神心理和社會(huì)因素的影響，便秘已嚴(yán)重影響了現(xiàn)代人的生活質(zhì)量；且在結(jié)腸癌、肝性腦病、乳腺疾病、早老性癡呆等疾病的發(fā)生中有重要作用；在急性心肌梗死、腦血管意外等癥時(shí)便秘可導(dǎo)致生命意外；便秘和部分肛腸疾病有密切的關(guān)系，如痔、肛裂等。因此，早期預(yù)防和合理治

2、療便秘將會(huì)大大減輕便秘帶來的嚴(yán)重后果和社會(huì)負(fù)擔(dān)。隨著現(xiàn)代生活水平的提高，人們對(duì)生活質(zhì)量的期望越來越高，對(duì)于既往常被忽視的一些功能性疾病更加重視。生活方式的改變、飲食結(jié)構(gòu)的變化使得便秘發(fā)病率逐漸升高，尤以老年及經(jīng)產(chǎn)女性居多。流行病學(xué)資料顯示，從美國的幾個(gè)全國性調(diào)查數(shù)據(jù)中得出美國便秘的發(fā)病率為2％，即大約有4百萬美國人患有便秘，每年有2-3百萬人應(yīng)用瀉劑輔助排便，且便秘患病率隨年齡的增大而增加。我國的流行病學(xué)資料顯示各地區(qū)發(fā)病率有所差異，但

3、都高于2％水平。
　　 治療便秘的藥物較多，但大多難收持久療效，且長期應(yīng)用易導(dǎo)致藥物依賴及副作用發(fā)生機(jī)率增加。祖國醫(yī)學(xué)對(duì)于便秘的治療積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，認(rèn)為慢性功能性便秘有虛實(shí)之分，臨床發(fā)現(xiàn)頑固性便秘以虛秘為主，虛秘中以血虛便秘居多，尤以老年及多產(chǎn)女性更為明顯。血虛便秘多病程較長，臨床癥狀頑固，治療效果欠佳。導(dǎo)師李國棟教授經(jīng)多年實(shí)踐，參詳古今，認(rèn)為血虛便秘治療療效不佳的原因是血瘀病理常常被忽視，中醫(yī)有“久病多瘀”、“久病入絡(luò)”之說

4、，慢性血虛便秘因病程遷延，導(dǎo)致腸壁絡(luò)脈瘀阻，腸道微循環(huán)障礙，影響腸壁營養(yǎng)，出現(xiàn)腸道動(dòng)力紊亂。洞察醫(yī)理，導(dǎo)師治療慢性血虛便秘在養(yǎng)血潤腸的基礎(chǔ)上投以活血化瘀之品，創(chuàng)養(yǎng)血活血方。
　　 頑固性便秘之所以療效不盡如人意，因?yàn)楝F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)便秘的病因、發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚。研究者們在不斷進(jìn)行著有益的探索，認(rèn)為功能性便秘患者存在結(jié)腸動(dòng)力紊亂，結(jié)腸平滑肌病變，結(jié)腸神經(jīng)叢及神經(jīng)遞質(zhì)異常，結(jié)腸粘膜水通道蛋白表達(dá)異常。盡管如此，仍不能完全闡釋便秘的發(fā)病

5、機(jī)制。隨著對(duì)ICC研究的深入，其在胃腸動(dòng)力障礙性疾病中作用越來越受到重視。
　　 便秘是臨床常見疾病，也是多種疾病常見的癥狀之一，可分為原發(fā)性便秘和繼發(fā)性便秘。本研究的內(nèi)容即指原發(fā)性功能性便秘。
　　 原發(fā)性頑固性功能性便秘治療困難，需長期反復(fù)用藥，長期反復(fù)應(yīng)用瀉劑，可加重腸壁損害，導(dǎo)致便秘癥狀更加頑固。促動(dòng)力藥物因可導(dǎo)致惡性心血管事件，亦為臨床少用。李國棟教授總結(jié)多年治療頑固性便秘的經(jīng)驗(yàn)創(chuàng)養(yǎng)血活血方治療血虛型頑固性便秘

6、，臨床療效滿意。李師勤求古訓(xùn)，匯通中西，并結(jié)合自己多年臨床實(shí)踐，對(duì)便秘一癥有獨(dú)到認(rèn)識(shí)。養(yǎng)血活血方是李教授多年臨床經(jīng)驗(yàn)的結(jié)晶。為進(jìn)一步驗(yàn)證養(yǎng)血活血方治療血虛便秘的臨床療效，探討治療機(jī)理并結(jié)合當(dāng)前國內(nèi)外研究進(jìn)展特設(shè)計(jì)本課題。本課題主要從以下2個(gè)方面進(jìn)行研究：
　　 第一部分臨床研究目的：驗(yàn)證養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘的臨床療效。
　　 方法：臨床研究共收集入選病例80例，隨機(jī)分成2組，治療組50例，對(duì)照組30例。分別給與養(yǎng)血活

7、血方、麻仁軟膠囊口服。療程2周，觀察治療前后癥狀積分變化。
　　 結(jié)果：經(jīng)臨床觀察進(jìn)一步證實(shí)養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘，療效確切，效果優(yōu)于對(duì)照藥物麻仁軟膠囊。2組藥物治療便秘均有一定效果，但養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘其痊愈與顯效率明顯高于對(duì)照組，養(yǎng)血活血方治療后患者排便情況積分及中醫(yī)證候積分下降程度均優(yōu)于對(duì)照組，且隨訪發(fā)現(xiàn)服用養(yǎng)血活血方患者，一般感覺良好，無大便溏瀉、腹部不適等副作用。
　　 第二部分實(shí)驗(yàn)研究實(shí)驗(yàn)一：血虛型功

8、能性便秘小鼠模型的制備目的：復(fù)制血虛型功能性便秘小鼠模型方法：綜合國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，結(jié)合前期實(shí)驗(yàn)研究，采用小鼠皮下注射鹽酸嗎啡的方法復(fù)制便秘模型小鼠，并結(jié)合小鼠斷尾放血法制造血虛模型。皮下注射嗎啡2.5mg/kg/d，共45天，對(duì)照組給予等體積等滲生理鹽水。
　　 結(jié)果：模型組小鼠表現(xiàn)精神萎靡，倦臥少動(dòng)嗜睡，毛聳無華，眼睛淡白無神，鼻唇淡白失澤；活動(dòng)減少等一系列符合中醫(yī)血虛證候的表現(xiàn)，且每日平均糞便量明顯減少，便出糞球粘滯，便后不

9、易脫落，部分排出糞塊變大，基本符合便秘特點(diǎn)。
　　 實(shí)驗(yàn)二：養(yǎng)血活血方對(duì)血虛型便秘模型小鼠結(jié)腸cajal間質(zhì)細(xì)胞的影響目的：探討?zhàn)B血活血方治療血虛型功能性便秘的機(jī)理方法：造模成功小鼠按照既定分組，分別給予灌胃養(yǎng)血活血方大、中、小劑量濃縮水煎劑，麻仁軟膠囊，莫沙比利?？瞻捉M、模型組給予等體積生理鹽水灌胃。共計(jì)2周。末次給藥后，處死動(dòng)物，打開腹腔，分離大腸，取距離肛門約1cm遠(yuǎn)端結(jié)腸腸段2段，于0.9％生理鹽水中沖洗干凈，分別置于福

10、爾馬林液中固定及液氮罐中冷凍保存待用。采用免疫組化技術(shù)及激光共聚焦顯微鏡掃描觀察各組小鼠結(jié)腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞（InterstitialcellsofCajalICC）的變化。
　　 結(jié)果：慢性功能性便秘模型小鼠存在結(jié)腸ICC的異常，便秘模型小鼠結(jié)腸ICC數(shù)量明顯減少，并有形態(tài)異常，與空白組小鼠比較ICC連接網(wǎng)絡(luò)欠完整。養(yǎng)血活血方灌胃14天后小鼠結(jié)腸ICC數(shù)量有明顯升高。西藥莫沙必利對(duì)便秘模型小鼠結(jié)腸ICC有一定影響，但未見統(tǒng)計(jì)

11、學(xué)差異，麻仁軟膠囊能夠提高ICC數(shù)量，但與養(yǎng)血活血方大、中劑量比較存在明顯差異。養(yǎng)血活血方中劑量能夠明顯增加便秘模型小鼠結(jié)腸ICC的數(shù)量，且對(duì)ICC數(shù)量的影響存在量效關(guān)系，大劑量養(yǎng)血活血方對(duì)ICC數(shù)量的改善更加明顯，幾乎接近空白組小鼠結(jié)腸ICC的數(shù)量。
　　 實(shí)驗(yàn)三：養(yǎng)血活血方對(duì)慢性便秘模型小鼠結(jié)腸c-kit蛋白表達(dá)的影響目的：從分子水平探討?zhàn)B血活血方治療血虛型功能性便秘的機(jī)理方法：取液氮冷凍保存的便秘模型小鼠結(jié)腸組織，利用we