二月桂酸二丁基錫（DBTD）對雄性大鼠生殖內(nèi)分泌干擾作用機理探討.pdf

1、二月桂酸二丁基錫(Dibutyltin dilaurate，DBTD)是化學性質(zhì)活潑、中等毒性的有機錫化合物，主要用作聚氯乙烯塑料的穩(wěn)定劑。本實驗室以往的研究發(fā)現(xiàn)，新出生Wistar。大鼠腹腔注射DBTD后，血清睪丸酮在一個月和三個月時檢測值都明顯偏高，并且雄鼠睪丸明顯增大，提示DBTD對大鼠的雄性激素水平和性器官產(chǎn)生了不可逆轉(zhuǎn)的影響。大鼠睪丸激素主要是由睪丸間質(zhì)細胞(Leydig細胞)合成和分泌的。睪丸間質(zhì)細胞分布在曲細精管間的結(jié)締組

2、織中，約占睪丸總重量的2％，但分泌的睪酮卻占睪酮總量的95％。本實驗通過測定DBTD對睪酮合成過程中的三種關(guān)鍵酶(細胞色素P450側(cè)鏈裂解酶、細胞色素P450c17α酶和3β-羥類固醇脫氫酶)轉(zhuǎn)錄水平的影響，以及對與供能有關(guān)的酶的影響，從分子生物學水平探討其對雄性生殖功能產(chǎn)生內(nèi)分泌干擾的作用機理。 目的：本實驗選用雄性wistar大鼠，應用RT-PCR、分光光度法測定DBTD對睪酮合成過程中的三種限速酶轉(zhuǎn)錄水平的影響，探討D

3、BTD對大鼠睪酮合成過程的可能影響。 方法：將新出生的雄性wistar大鼠分為陰性對照組和1、0.1、0.01 mg/Kg/day三個劑量組，每組10只。將溶于玉米油的DBTD經(jīng)皮下注射染毒大鼠，每天一次，連續(xù)5天，染毒結(jié)束后繼續(xù)飼養(yǎng)至一個半月，斷頭處死，取其雙側(cè)睪丸，稱重，計算性器官指數(shù)，并應用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(RT-PCR)、分光光度法檢測睪酮合成相關(guān)酶的合成及活性的改變。 結(jié)果：觀察發(fā)現(xiàn)，實驗組雄鼠相互攻擊

4、行為比溶劑對照組明顯，并且比較活潑。0.1mg/Kg/day劑量組的睪丸臟器系數(shù)高于溶劑陰性對照組，并且1mg/Kg/day劑量組與對照組之間有統(tǒng)計學差異。各實驗組食物利用率均低于溶劑對照組，并且0.1mg/Kg/day劑量組與對照組之間有統(tǒng)計學差異。應用分光光度法測定了大鼠睪丸中乳酸脫氫酶(LDH)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)的活力改變，結(jié)果顯示：各實驗組大鼠的LDH、SDH、G-6-PD活力與對照

5、組之間均無統(tǒng)計學差異。 應用RT-PCR技術(shù)測定了大鼠睪酮合成過程中的三種關(guān)鍵酶轉(zhuǎn)錄水平的變化，結(jié)果顯示：各實驗組3β-HSD的相對表達量與對照組之間均無統(tǒng)計學差異；而P450scc、CYP17的相對表達量隨染毒劑量的增加，各實驗組均有所增加，并且1mg/Kg/day劑量組的P450scc，0.1、1mg/Kg/day劑量組的CYP17相對表達量與對照組之間有統(tǒng)計學差異。 結(jié)論：二月桂酸二丁基錫可使雄性W