莪術(shù)醇對(duì)肝癌、結(jié)腸癌的影響及機(jī)理研究.pdf

1、化療藥物是治療腫瘤的重要手段,具有顯著的抗腫瘤作用;但同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞也有明顯的毒性作用,在臨床使用中不良反應(yīng)多而嚴(yán)重.因此,創(chuàng)制新型抗腫瘤藥物十分必要.莪術(shù)油是傳統(tǒng)中藥莪術(shù)的揮發(fā)油,主要含莪術(shù)醇、β-欖香烯等成分,其中莪術(shù)醇含量最高.臨床有報(bào)道莪術(shù)醇對(duì)宮頸癌有較好的療效,且無明顯不良反應(yīng).而β-欖香烯雖也有抗腫瘤作用,但同時(shí)具有多種副作用,限制了其應(yīng)用.該實(shí)驗(yàn)自行提取莪術(shù)醇,制備莪術(shù)油和莪術(shù)醇的脂質(zhì)體,并研究其對(duì)肝癌和結(jié)腸癌的作用及機(jī)理

2、,為臨床上利用莪術(shù)提取物治療腫瘤提供理論依據(jù).方法:實(shí)驗(yàn)采用低溫結(jié)晶、回流的方法提取莪術(shù)醇;鑒定后利用機(jī)械分散和超聲波結(jié)合法制備莪術(shù)醇脂質(zhì)體和莪術(shù)油脂質(zhì)體.體外培養(yǎng)HepG2肝癌細(xì)胞和HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞.用生長曲線和MTT法觀察莪術(shù)醇、莪術(shù)油和β-欖香烯對(duì)兩種細(xì)胞生長的影響;用Hoechst 33258/PI雙染色、激光共聚焦觀察法和DNA凝膠電泳法測(cè)定細(xì)胞凋亡情況;分別采用RT-PCR、免疫組化法測(cè)定HepG2細(xì)胞和HT-29細(xì)胞中

3、COX-2 mRNA和VEGF mRNA表達(dá)情況、荷H22細(xì)胞小鼠腫瘤組織中COX-2和VEGF的表達(dá)情況.結(jié)論:1.成功地從莪術(shù)油中提取出莪術(shù)醇,并制備成莪術(shù)醇和莪術(shù)油脂質(zhì)體.2.莪術(shù)醇能明顯抑制體外培養(yǎng)的HT-29和HepG2細(xì)胞生長,抑制作用呈時(shí)間劑量依賴性.3.莪術(shù)醇能明顯抑制H22荷瘤小鼠腫瘤的增長.4.莪術(shù)醇在體外可誘導(dǎo)HT-29和HepG2細(xì)胞凋亡.5.莪術(shù)醇可明顯抑制H22荷瘤小鼠腫瘤組織中VEGF和COX-2的表達(dá).6