麻黃類藥對組成規(guī)律的基礎(chǔ)研究——麻黃—杏仁藥對(Ⅱ).pdf

1、研究背景與意義:
　　 麻黃-杏仁藥對為上述六個藥對之一，麻黃辛、微苦，溫，具有發(fā)汗解表，宣肺平喘，利水消腫的功效;苦杏仁苦、微溫、有小毒，能止咳平喘，潤肺通便。兩藥配對，麻黃辛散善于宣暢肺氣而平喘利水，杏仁長于宣肺氣而止咳平喘，兩藥一宣一降，一剛一柔，互制其偏，其平喘止咳之力增強(qiáng)。在麻黃湯、麻杏石甘湯、三拗湯等方劑中，均含有麻黃-杏仁藥對。
　　 三拗湯最早出自《太平惠民合劑局方》，由《傷寒論》中麻黃湯減去桂枝而成，由

2、麻黃（不去節(jié)）、杏仁（不去皮尖）、甘草（不炙）組成，各9克。功用宣肺解表，止咳平喘。主治外感風(fēng)寒之咳嗽、胸悶、鼻塞身重、語言不出，或傷風(fēng)傷冷，頭痛目眩，四肢拘倦，咳嗽痰多，胸滿氣短者，為治療外感咳嗽的經(jīng)典方劑。
　　 本文以三拗湯中麻黃-杏仁的配伍形式為基礎(chǔ)，麻黃9g、杏仁9g的用量及劑量比(1∶1)為參考，并上下調(diào)整杏仁用量，另設(shè)麻黃-杏仁劑量比為1∶0.5和1∶2兩組，運(yùn)用現(xiàn)代藥理學(xué)方法來研究麻黃和杏仁藥對配伍前后和不同配比

3、的急性毒性變化，主要藥理作用及其相互作用，定量評價藥對配伍對毒性、藥效的影響，明確配伍的增效減毒作用。
　　 研究目的:
　　 本文從急性毒性及主要藥理作用方面揭示麻黃-杏仁藥對的配伍規(guī)律:
　　 (1)通過比較麻黃-杏仁配伍前后及不同配比的急性毒性變化，并定量分析兩藥合用的相互作用，探求麻黃-杏仁藥對配伍對兩藥毒性的影響。
　　 (2)通過比較麻黃-杏仁配伍前后及不同配比的止咳、平喘和祛痰作用的變化，并

4、應(yīng)用中效原理進(jìn)行相互作用統(tǒng)計分析，評價麻黃和杏仁主要藥理效應(yīng)的相互作用，從藥效學(xué)角度揭示麻黃-杏仁配伍的科學(xué)內(nèi)涵。
　　 研究方法:
　　 1急性毒性實驗及其相互作用研究
　　 1.1取昆明小鼠250只，按麻黃、杏仁、麻黃-杏仁(1∶0.5)、麻黃-杏仁(1∶1)和麻黃-杏仁(1∶2)分為5個組，每組分別設(shè)5個劑量組，每組10只，雌雄各半。根據(jù)預(yù)實驗確定的Dn（最小劑量）、Dm（最大劑量），定出相鄰兩劑量之間比值

5、除杏仁(1∶0.7)外均為1∶0.8。實驗前禁食不禁水12小時，一次性灌胃給予受試藥物，給藥后即刻觀察，以后每天觀察一次，連續(xù)7天，觀察記錄小鼠活動情況（如飲食、腹瀉、毛發(fā)等）及死亡數(shù)目，記錄各組小鼠中毒癥狀及死亡情況，并計算半數(shù)致死量(LD50)和95％可信限。
　　 1.2將實驗所得數(shù)據(jù)進(jìn)行中效法分析，運(yùn)用Calcusyn軟件處理，得到合用指數(shù)(CI)，CI＞1為拮抗作用，CI＜1為協(xié)同作用，CI=1為相加作用。
　　

6、 2大鼠平喘實驗采用大鼠卵蛋白致喘模型，選取雄性SD大鼠64只，隨機(jī)分成8組，每組8只，分別為空白對照組、哮喘模型組、陽性藥（地塞米松）組、麻黃組、杏仁組、麻黃-杏仁1∶0.5組、麻黃-杏仁1∶1組和麻黃-杏仁1∶2組，造模后灌胃給藥，在末次給藥后，以1％卵蛋白噴霧激發(fā)，觀察記錄大鼠的引喘潛伏期，測定大鼠血液中各項血細(xì)胞計數(shù)，并取出大鼠肺組織，用于制作肺組織切片和測量肺組織濕干重比值(Wet Dry ratio，W/D)。
　　

7、 3小鼠氨水引咳實驗取昆明小鼠260只，按麻黃、杏仁、麻黃-杏仁(1∶0.5)、麻黃-杏仁(1∶1)、麻黃-杏仁(1∶2)和全方分為6個組，每組分別設(shè)4個劑量組，每組10只，另設(shè)空白組（蒸餾水）和陽性藥（可待因）組，連續(xù)灌胃給藥5天，每天一次，末次給藥后1小時氨水引咳，觀察記錄小鼠的咳嗽潛伏期和2min內(nèi)咳嗽次數(shù)。統(tǒng)計各組結(jié)果，并定量分析麻黃-杏仁藥對止咳的相互作用。4小鼠祛痰實驗觀察對小鼠呼吸道分泌液量的影響（小鼠氣管段酚紅法），分

8、組同止咳實驗，設(shè)空白組（蒸餾水）和陽性藥（鹽酸氨溴索）組，連續(xù)灌胃給藥七天，末次給藥30min后，腹腔注射5％酚紅溶液，30min后處死，剪開頸部皮膚，分離甲狀軟骨至氣管分支處的一段氣管，置于4ml生理鹽水中，加入0.2ml氫氧化鈉顯色后，用分光光度計于558nm處測定其吸收度，計算酚紅含量。定量分析麻黃-杏仁藥對祛痰的相互作用。
　　 5統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，實驗數(shù)據(jù)以((x)±s)表示，均數(shù)比

9、較用單向方差分析，多重比較方差齊性者用LSD分析、方差不齊性者用Dunnett's分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，相互作用用Calcusyn軟件分析。
　　 研究結(jié)果:
　　 1急性毒性實驗
　　 麻黃LD50為93.78g/kg（81.30～107.68 g/kg）、杏仁LD50為29.14 g/kg（21.22～37.88 g/kg）、麻黃-杏仁1∶0.5配伍組LD50為53.49 g/kg（37.4

10、5～70.92 g/kg）、麻黃-杏仁1∶1配伍組LD50為62.44 g/kg(44.80～77.38 g/kg)、麻黃-杏仁1∶2配伍組LD50為73.68 g/kg(55.49～95.00 g/kg)。
　　 相互作用分析顯示，麻黃與杏仁三個配伍組的急性毒性均具有拮抗作用，其拮抗作用大小為麻黃-杏仁(1∶2)組＞麻黃-杏仁(1∶1)組＞麻黃-杏仁(1∶0.5)組，即隨著杏仁配伍比例的增大，急性毒性的拮抗作用增強(qiáng)。
　

11、　 2大鼠平喘實驗
　　 與模型組比較，各藥物組均能明顯延長大鼠的哮喘潛伏期(P＜0.01);各藥物治療組間相比，麻杏1∶0.5組對哮喘潛伏期的延長作用明顯優(yōu)于其他各組(P＜0.05)，麻黃組與麻杏1∶1組、杏仁組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 與空白對照組比較，模型組嗜酸性粒細(xì)胞百分比明顯增加(P＜0.05)，而各個給藥組與空白對照組之間未見顯著性差異，各給藥組之間的差異也無統(tǒng)計學(xué)意義;與模型組比較，除

12、麻黃組外，其他各給藥組的嗜酸性粒細(xì)胞百分比均顯著降低(P＜0.05)。與模型組比較，各藥物組血小板計數(shù)均顯著降低(P＜0.01);各給藥組之間比較，地塞米松組血小板計數(shù)明顯低于麻黃組、杏仁組和麻杏1∶2組(P＜0.05)。
　　 3小鼠氨水引咳實驗
　　 3.1對小鼠咳嗽潛伏期的影響
　　 與空白組比較，可待因組、麻-杏1∶0.5組(1)、麻-杏1∶0.5組(3)、麻-杏1∶1組(1)、麻-杏1∶1組(2)和麻-

13、杏1∶1組(3)均能明顯延長氨水引起的小鼠咳嗽潛伏期，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或0.01），其他各組與空白組比較無顯著性差異(P＞0.05)。與陽性組比較，麻-杏1∶0.5組(1)、麻-杏1∶0.5組(2)、麻-杏1∶1組(1)、麻-杏1∶1組(2)、麻-杏1∶1組(3)和麻-杏1∶2組(1)均無顯著性差異(P＞0.05)。麻黃、杏仁和三個配伍組內(nèi)四個劑量之間進(jìn)行兩兩比較，其差異均無顯著意義(P＞0.05)。
　　 3.2

14、對小鼠咳嗽次數(shù)的影響
　　 與空白組比較，可待因組、杏仁組(1)、杏仁組(2)、麻-杏1∶0.5組(1)、麻-杏1∶0.5組(2)和麻-杏1∶1組(1)均能明顯減少氨水引起的小鼠咳嗽次數(shù)，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或0.01），其他各組與空白組比較無顯著性差異(P＞0.05)。與陽性組比較，空白組、杏仁組(4)、麻-杏1∶2組(3)和麻-杏1∶2組(4)均有顯著性差異(P＜0.05)，其他各組與陽性組相比均無顯著性差異(P＞

15、0.05)。麻黃、杏仁和三個配伍組內(nèi)四個劑量之間進(jìn)行兩兩比較，其差異均無顯著意義(P＞0.05)。從各給藥組四個劑量的有效率來看，除麻黃-杏仁1∶1組外，各組都有一定的量效關(guān)系，即隨著給藥劑量的增大，有效率也有增加的趨勢。
　　 3.3麻黃-杏仁藥對氨水致咳小鼠咳嗽潛伏期影響的相互作用
　　 麻黃-杏仁(1∶0.5)配伍，當(dāng)有效率低于15％時，效應(yīng)-合用指數(shù)(CI)小于1，表現(xiàn)出止咳協(xié)同作用，即低劑量時有拮抗作用，高劑量

16、時有協(xié)同或者相加作用。當(dāng)有效率為44.8％時，與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。有統(tǒng)計學(xué)差異的有效率范圍大致在50.7％-86.1％時，并且該效應(yīng)段為協(xié)同作用。麻黃-杏仁(1∶1)配伍，效應(yīng)-合用指數(shù)(CI)小于1，該配伍表現(xiàn)出止咳協(xié)同作用，即無論低劑量還是高劑量，均表現(xiàn)出協(xié)同作用，有統(tǒng)計學(xué)差異的有效率范圍大致在69.0％-80.5％，且該段效應(yīng)為協(xié)同作用。麻黃-杏仁(1∶2)配伍，當(dāng)有效率高于60％時，效應(yīng)-合用指數(shù)(CI)大于1，

17、表現(xiàn)出止咳拮抗作用，即低劑量時有協(xié)同或相加作用，高劑量時有拮抗作用，而此時與空白對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4小鼠祛痰實驗
　　 與空白組比較，陽性藥（鹽酸氨溴索）組、杏仁組(1)、杏仁組(3)、麻-杏1∶0.5組(1)、麻-杏1∶0.5組(2)、麻-杏1∶0.5組(3)、麻-杏1∶1組(1)、麻-杏1∶1組(2)、麻-杏1∶1組(3)、麻-杏1∶1組(4)、麻-杏1∶2組(1)、麻-杏1∶2組

18、(2)和麻-杏1∶2組(3)均能明顯增加氣管酚紅排泄量，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或0.01），其他各組與空白組比較無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 從各給藥組四個劑量的有效率來看，除麻黃-杏仁1∶1組外，各組都有一定的量效關(guān)系，即隨著給藥劑量的增大，有效率也有增加的趨勢。
　　 麻黃-杏仁藥對祛痰實驗的相互作用:麻黃-杏仁(1∶0.5)配伍，當(dāng)有效率在10％到60％之間時，效應(yīng)-合用指數(shù)(CI)小于1，表現(xiàn)出祛

19、痰協(xié)同作用，即低劑量和高劑量時有拮抗作用，中劑量時有協(xié)同或者相加作用。當(dāng)有效率大于59.5％時，與空白對照組比較，差異才有統(tǒng)計學(xué)意義。麻黃-杏仁(1∶1)配伍，當(dāng)有效率小于90％時，效應(yīng)-合用指數(shù)(CI)小于1，表現(xiàn)出祛痰協(xié)同作用，即低劑量時有協(xié)同作用，高劑量時有拮抗作用，且此效應(yīng)段有統(tǒng)計學(xué)差異。麻黃-杏仁(1∶2)配伍，整個效應(yīng)段都表現(xiàn)出拮抗作用(CI＞1)。
　　 結(jié)論:
　　 1急性毒性及其相互作用結(jié)果顯示，麻黃和