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1、目的:三鄰甲苯磷酸酯(TOCP)常作為增塑劑、軟化劑及阻燃劑等,在工業(yè)中使用非常廣泛,本課題主要觀察TOCP對(duì)小鼠睪丸曲細(xì)精管及精子發(fā)生的影響,探究神經(jīng)病靶酯酶(NTE)在TOCP抑制小鼠精子發(fā)生中的作用。
方法:1、用HE染色法觀察TOCP對(duì)小鼠睪丸曲細(xì)精管及精子發(fā)生的影響;2、用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)NTE在小鼠睪丸中表達(dá);3、用戊酸苯酯水解法檢測(cè)TOCP對(duì)小鼠睪丸NTE活性的影響4、用RT-PCR法檢測(cè)TOCP對(duì)小鼠睪丸組
2、織中NTE mRNA表達(dá)的影響。
結(jié)果:1、分別用不同濃度(0,100,200,400 mg/kg)的TOCP給成年雄性小鼠連續(xù)染毒14d后,結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,200和400 mg/kg TOCP處理組小鼠的睪丸系數(shù)明顯降低(P<0.05),而100 mg/kg濃度的TOCP則并沒(méi)有明顯抑制小鼠的睪丸系數(shù)(P>0.05)。不同濃度的TOCP對(duì)附睪系數(shù)則無(wú)明顯差異(P>0.05)。2、與對(duì)照組相比,200和400 mg/k
3、g TOCP處理組小鼠睪丸的曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)顯著紊亂,其生精細(xì)胞脫落,而100 mg/kg TOCP處理組小鼠的睪丸曲細(xì)精管則無(wú)明顯破壞。與對(duì)照組相比,100,200及400mg/kg的TOCP均可抑制精子的數(shù)量(P<0.05)。3、免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,除曲細(xì)精管的表層細(xì)胞之外,NTE在曲細(xì)精管的不同生精細(xì)胞(包括精原干細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞和精子)均高表達(dá)。4、TOCP呈濃度依賴(lài)式地抑制小鼠睪丸中的NTE活性(P<0.05),
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