神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)一氧化碳中毒后大鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞Nogo-A的影響.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)一氧化碳中毒后大鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞NogoA的影響姓名：耿韋韋申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：王蘇平20090601神經(jīng)節(jié)苷脂是一種含唾液酸的糖神經(jīng)鞘脂類(lèi)竊著，是人類(lèi)細(xì)胞膜的組成成份，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量尤其豐富。通常根掘唾液酸數(shù)目的不同分為GM(單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂)GD(二唾液酸神經(jīng)節(jié)一脂)和GT(三唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂)等。又根據(jù)糖基數(shù)目不同將GM分為T(mén)iM1(含4個(gè)糖基)、GM2(含3個(gè)糖基)

2、、GM3(含2個(gè)糖基)。神經(jīng)節(jié)苷胎具有豐富的生物學(xué)功能，如維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定：作為細(xì)胞標(biāo)記和抗原參與細(xì)胞細(xì)胞間相互作用和識(shí)別；作為分化標(biāo)志，參與細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)和：言息傳遞；作為某些生物活性物質(zhì)的受體，影響細(xì)胞質(zhì)膜蛋白的功能及參與細(xì)胞粘附等。大量實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，神經(jīng)節(jié)苷質(zhì)類(lèi)物質(zhì)能調(diào)節(jié)與神經(jīng)元膜有關(guān)的神經(jīng)功能，特別是對(duì)神經(jīng)組織分化成熟和神經(jīng)組織損傷后有明顯促進(jìn)作用；其中單唾液酸四已糖神經(jīng)節(jié)苷脂(GM1)對(duì)神經(jīng)元有明顯的保護(hù)作用。GMl是最

3、重要的神經(jīng)節(jié)苷脂之一，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變的治療中起重要作用，在神經(jīng)發(fā)生，生長(zhǎng)及分化中起必不可少的作用。外源性GMl可能過(guò)血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)并整合到神經(jīng)細(xì)胞膜發(fā)揮作用。GMl對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷具有明顯的修復(fù)作用。GMl對(duì)CO中毒所致的少突膠質(zhì)細(xì)胞損害是否有保護(hù)作用，其作用是否與少突膠質(zhì)細(xì)胞上NogoA蛋白有關(guān)目前尚無(wú)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)擬在細(xì)胞水平對(duì)此加以探討。方法：(1)取新生2天SD大鼠的視神經(jīng)，采用組織塊培養(yǎng)法，用DMEM／Fl2化學(xué)

4、限定培養(yǎng)液培養(yǎng)、純化少突膠質(zhì)細(xì)胞。細(xì)胞免疫化學(xué)檢測(cè)少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘堿性蛋白(Myelinbasicprotein，MBP)表達(dá)，鑒定少突膠質(zhì)細(xì)胞，并計(jì)算陽(yáng)性率。(2)在排除缺氧的影響下，1％CO處理少突膠質(zhì)細(xì)胞，采用RTPCR及細(xì)胞免疫組化觀察6h、24h、48h少突膠質(zhì)細(xì)胞NogoAmRNA及其蛋白表達(dá)。(3)在培養(yǎng)液中預(yù)先加入GMl，1％CO處理少突膠質(zhì)細(xì)胞，檢測(cè)NogoAmRNA及其蛋白的表達(dá)。結(jié)果：。1、組織塊24h開(kāi)始貼壁，4