人絨毛膜促性腺激素對乳腺癌侵襲轉移作用的研究.pdf

1、目的： 通過構建黃體生成素受體(Luteinizing Hormone/human Chorionic Gonadotropin receptor，LHR)真核表達質(zhì)粒載體(pcDNA3.1(+)-LHR)，轉染乳腺癌細胞，研究人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin，hCG)對乳腺癌細胞侵襲轉移能力的影響。 方法： 用Kpn I/Hpa I雙酶切LHR-eDNA質(zhì)粒載體；Kp

2、n I/EcoR V雙酶切pcDNA3.1(+)載體，構建pcDNA3.1(+)一LHR質(zhì)粒載體，穩(wěn)定轉染MCF-7乳腺癌細胞，建立穩(wěn)定高表達LHR的乳腺癌細胞株。應用體外侵襲轉移實驗方法，觀察hCG對乳腺癌細胞遷移能力的影響。在此基礎上，以半定量RT-PCR，分析hCG對乳腺癌細胞MMP1、MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP3、VEGF等侵襲轉移相關基因轉錄表達的影響。 結果： 1、構建pcDNA3.1(+)-L

3、HR真核表達質(zhì)粒載體，通過酶切圖譜及測序等方法鑒定。 2、pcDNA3.1(+)-LHR穩(wěn)定轉染MCF-7細胞，通過RT-PCR和細胞內(nèi)cAMP濃度測定，證實轉染LHR的MCF-7細胞高表達LHR。 3、MTT法測定hCG對乳腺癌細胞增殖力影響，轉染LHR的MCF-7細胞增殖力無明顯改變。 4、應用體外侵襲轉移實驗方法，測定hCG對乳腺癌細胞侵襲力影響，轉染LHR的MCF-7細胞侵襲力明顯降低。 5、應用