兔眼玻璃體腔注射硫酸異帕米星的眼內(nèi)安全性研究.pdf

1、目的：目前臨床上常用的治療細(xì)菌性眼內(nèi)炎的方法為玻璃體腔注射萬(wàn)古霉素聯(lián)合頭孢他啶。萬(wàn)古霉素為臨床上治療細(xì)菌性眼內(nèi)炎的一線(xiàn)用藥，它是一窄譜殺菌抗生素，僅對(duì)革蘭陽(yáng)性菌有強(qiáng)大的殺菌作用，所以常和抗革蘭陰性桿菌的頭孢他啶聯(lián)合應(yīng)用治療眼內(nèi)炎。近年來(lái)細(xì)菌抗藥性不斷增加成為臨床治療感染性眼內(nèi)炎的難題，任喆等研究發(fā)現(xiàn)革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)萬(wàn)古霉素的敏感性有所下降，從100.0％降至84.4％：此外有研究表明萬(wàn)古霉素對(duì)凝固酶陰性的葡萄球菌（表皮葡萄球菌，溶血葡萄球

2、菌，人葡萄球菌等）敏感性降低。2005年我國(guó)研究資料顯示耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的發(fā)生率已達(dá)51.3％，而上海更是高達(dá)78.4％。表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌耐藥菌株也有迅速增長(zhǎng)趨勢(shì)并且表現(xiàn)出對(duì)萬(wàn)古霉素的高度多樣性耐藥。這為臨床用藥敲響了警鐘．頭孢他啶是第三代頭孢菌素類(lèi)抗生素，他與萬(wàn)古霉素聯(lián)合應(yīng)用主要起抗革蘭陰性菌的作用（銅綠假單胞菌）。頭孢他啶隨著臨床用藥的大劑量，長(zhǎng)時(shí)間，以及用藥不規(guī)范，革蘭陰性桿菌對(duì)頭孢他啶的耐藥性逐年增

3、加：2000年銅綠假單胞菌對(duì)頭孢他啶的耐藥率是14％。而戴濱等統(tǒng)計(jì)2006年銅綠假單胞菌對(duì)頭孢他啶的耐藥性已高達(dá)60％。硫酸異帕米星是第三代半合成氨基糖甙類(lèi)抗生素，具有抗菌譜廣、殺菌活性強(qiáng)、耐藥性低、毒副作用小及良好的抗生素后效應(yīng)等優(yōu)勢(shì)已廣泛用于治療嚴(yán)重感染性疾病和混合感染性疾?。畤?guó)內(nèi)外許多研究資料顯示異帕米星表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌等多種致病菌的體外抗菌活性較強(qiáng)，而這些正是細(xì)菌性眼內(nèi)炎的主要致病菌。但眼內(nèi)用藥尚未見(jiàn)報(bào)

4、道，本研究希望通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察硫酸異帕米星玻璃體腔內(nèi)注藥后的視網(wǎng)膜毒性，從而為臨床眼內(nèi)用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 1、篩選健康無(wú)眼疾的成年新西蘭大白兔24只，常規(guī)飼養(yǎng)一周。
　　 2、術(shù)前常規(guī)測(cè)量并記錄每只兔子的眼電生理：行全視野視網(wǎng)膜電流圖（FERG）檢查，記錄暗示混合反應(yīng)(Max-R)的b波振幅變化。
　　 3、將24只實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為A、B、C、D四組，每組6只。硫酸異帕米星以生理鹽水分別

5、稀釋成0.1ml含0.5，1.0，2.0，4.0mg異帕米星藥液備用。隨機(jī)選取每只兔的一眼為實(shí)驗(yàn)眼，在玻璃體內(nèi)分別注射0.1ml不同濃度的藥物；對(duì)側(cè)眼為對(duì)照眼，在玻璃體內(nèi)分別注射0.1ml生理鹽水。
　　 4、術(shù)后1天，3天，7天，14天觀察每只實(shí)驗(yàn)兔的眼前節(jié)及眼底情況并記錄結(jié)果。每組隨機(jī)抽取兩只實(shí)驗(yàn)兔復(fù)查FERG。比較各組在各時(shí)間點(diǎn)的電生理值有無(wú)差異及術(shù)前術(shù)后的各時(shí)間點(diǎn)數(shù)值變化，然后對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 5、各

6、組術(shù)后第3、7、14天均隨機(jī)取兩只兔（此時(shí)已做完電生理檢查），摘取眼球，每只兔的兩只眼一只放入10％福爾馬林液中固定，48h后常規(guī)脫水，石臘包埋，制成石蠟切片，做HE染色，觀察視網(wǎng)膜的大體形態(tài)。每只兔的另一只眼立即置入4℃、2.5％戊二醛液中固定，制成投射電鏡圖片，觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變。
　　 結(jié)果：
　　 1、裂隙燈檢查：0.5mg，1.0mg，2.0mg，4.0mg四組除了0.5mg組有兩只眼由于注藥技術(shù)原因，在玻璃

7、體腔注藥時(shí)損傷了晶體，注藥后第一天出現(xiàn)了晶體渾濁。其余各組均無(wú)角膜水腫、渾濁、后彈力層無(wú)皺褶；前房無(wú)出血、滲出等炎癥反應(yīng)；晶狀體無(wú)渾濁；玻璃體無(wú)渾濁、出血。各組玻璃體注藥后略見(jiàn)渾濁，一天后消失。
　　 2、直接檢眼鏡檢查：0.5mg，1.0mg，2.0mg，4.0mg各組均無(wú)玻璃體渾濁、出血，視網(wǎng)膜均無(wú)水腫，出血，脫離，視網(wǎng)膜血管均無(wú)閉塞，迂曲，擴(kuò)張。D組（4mg組）中一只眼于注藥后第一天視網(wǎng)膜局部有水腫，第3天水腫明顯減輕，第

8、14天時(shí)水腫消失，其余無(wú)異常。
　　 3、視網(wǎng)膜電流圖檢查：Max-R的b波振幅，其中C(2mg)組實(shí)驗(yàn)眼于注藥后3-7天振幅明顯下降，與對(duì)照組有顯著性差異，14天時(shí)又恢復(fù)正常；D(4mg)組實(shí)驗(yàn)眼注藥后3天開(kāi)始振幅下降，明顯低于對(duì)照眼，與對(duì)照眼有顯著性差異；其余二組各時(shí)間段實(shí)驗(yàn)眼b波振幅與對(duì)照眼無(wú)顯著性差異。
　　 4、光鏡結(jié)果：對(duì)照組和各藥物劑量組在各時(shí)間段視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)均未見(jiàn)異常。
　　 5、電鏡結(jié)果：0.

9、5mg，1.0mg組和2.0mg，4.0mg組的對(duì)照組各時(shí)間段視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)均未見(jiàn)異常。2.0mg，4.0mg組實(shí)驗(yàn)眼各時(shí)間段異常改變?nèi)缦拢篊組(2.0mg)3-7天時(shí)可見(jiàn)色素上皮層線(xiàn)粒體輕度腫脹，14天可見(jiàn)色素上皮層線(xiàn)粒體腫脹消失；D組(4.0mg)3天，色素上皮層線(xiàn)粒體輕腫脹，可見(jiàn)巨大溶酶體，7天時(shí)色素上皮層線(xiàn)粒體腫脹，脊消失。14天色素上皮細(xì)胞內(nèi)線(xiàn)粒體中度水腫，外節(jié)膜盤(pán)紊亂，外從狀層，內(nèi)核層，節(jié)細(xì)胞中度水腫，神經(jīng)纖維層水腫。