CO-,2-激光膀胱粘膜剝脫術(shù)的實驗研究.pdf

1、本課題以經(jīng)國產(chǎn)空芯金屬紅外波導(dǎo)傳輸?shù)腃O<,2>激光為工具，首先進行開放性犬膀胱粘膜剝脫術(shù)的實驗研究，在對手術(shù)的有效性及安全性做出全面評估的基礎(chǔ)上，進一步對腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)的可行性進行了初步的探討。 1．目的： 探討以經(jīng)多晶鍺空芯金屬紅外波導(dǎo)傳輸?shù)腃O<,2>激光為工具的膀胱粘膜剝脫術(shù)的可行性、有效性與安全性，以及CO<,2>激光對膀胱組織的相關(guān)作用機制。 2．方法： 2.1 CO<,2

2、>激光犬膀胱粘膜剝脫術(shù)研究以Beagle犬為研究對象，以經(jīng)國產(chǎn)多晶鍺空芯金屬紅外波導(dǎo)傳輸?shù)腃O<,2>激光為手術(shù)工具，在觀察波導(dǎo)的機械性能、傳能功耗及光斑特性并篩選出針對膀胱組織的適宜激光工作參數(shù)的基礎(chǔ)上，行開放性CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)。采用膀胱組織測溫及常規(guī)組織病理學(xué)檢查等手段觀察CO<,2>激光對膀胱組織的汽化效果及膀胱粘膜上皮的再生過程；通過圍手術(shù)期觀察及膀胱測壓、靜脈腎盂造影等功能檢查方法觀察手術(shù)的遠期療效，進而綜合評價

3、CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)的可行性、有效性及安全性。 2.2 CO<,2>激光對犬膀胱組織作用范圍的顯微FT-IR分析以術(shù)后即刻的膀胱組織冰凍切片為研究對象，應(yīng)用顯微：FT-IR原位檢測技術(shù)獲取來源于不同層次的膀胱肌肉組織的原始FT-IR光譜，通過光譜重建、差譜分析及曲線擬合等方法，定量分析膀胱肌肉組織蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)組成及其相對含量的變化，觀察CO<,2>激光對膀胱組織在分子水平上的實際作用范圍。 2.3 CO<,2

4、>激光對成纖維細胞光生物調(diào)節(jié)效應(yīng)的觀察以體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細胞為觀察對象，建立CO<,2>激光的光生物調(diào)節(jié)效應(yīng)研究模型，通過對CO<,2>激光照射后成纖維細胞增殖規(guī)律的觀察，探討CO<,2>激光與膀胱纖維化間的潛在關(guān)系。 2.4腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)的體外模擬試驗以空芯金屬紅外波導(dǎo)為主要材料，設(shè)計制作膀胱粘膜剝脫器，建立以生理鹽水為充盈介質(zhì)的膀胱腔內(nèi)手術(shù)模型，以離體新鮮犬膀胱組織為實驗對象，進行水下CO<,2>激

5、光膀胱粘膜剝脫試驗，探討腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)的可行性。 3．結(jié)果： 3.1 CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)研究國產(chǎn)多晶鍺空芯金屬紅外波導(dǎo)的可曲半徑≤10.0cm，傳輸功耗約20％，照射距離≤5.0cm時的輸出光斑服從高斯分布，波導(dǎo)使用靈活，操作方便，能夠滿足膀胱粘膜剝脫術(shù)的需要。照射距離≤5cm、光斑移動速度2～8mm/s是膀胱粘膜剝脫的適宜工作參數(shù)。CO<,2>激光的汽化深度僅限于粘膜及粘膜下層，對膀胱肌

6、層無明顯損傷。術(shù)后2周膀胱組織以非特異性炎癥反應(yīng)為主要病理變化，術(shù)后4周粘膜上皮再生活躍，術(shù)后12周膀胱粘膜完全再生。圍手術(shù)期動物康復(fù)順利，未見有大量血尿及膀胱穿孔等嚴重并發(fā)癥發(fā)生。觀察期末(12周)動物膀胱順應(yīng)性良好，上尿路形態(tài)及功能未見異常。實驗結(jié)果表明，CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)安全、有效、可行。 3.2 CO<,2>激光對犬膀胱組織作用范圍的顯微FT-IR分析CO<,2>激光照射后，蛋白質(zhì)分子二級結(jié)構(gòu)組成及其相對含量

7、的變化區(qū)域位于膀胱肌層的組織學(xué)損傷界面(光鏡水平)外約60μm的范圍內(nèi)，而蛋白質(zhì)分子能量狀態(tài)變化區(qū)域則延伸至約90μm的范圍內(nèi)。實驗結(jié)果提示，動態(tài)掃描式剝脫過程中的CO<,2>激光對膀胱肌層的實際作用范圍可超出其組織學(xué)損傷邊界，但仍小于其靜態(tài)作用時的范圍。 3.3 CO<,2>激光對成纖維細胞光生物調(diào)節(jié)效應(yīng)的觀察CO<,2>激光對人皮膚成纖維細胞的增殖有明顯抑制作用，二者間存在一定的劑量—效應(yīng)與時間—效應(yīng)依賴關(guān)系，照射后24小時的抑制作

8、用最顯著。實驗結(jié)果表明，CO<,2>激光與術(shù)后膀胱膀胱纖維化間無直接的因果關(guān)系。 3.4腔內(nèi)CO<,2>激光膀胱粘膜剝脫術(shù)的體外模擬試驗CO<,2>激光可以在水下有效剝脫膀胱粘膜，組織碳化輕微，創(chuàng)面基底潔凈。實驗結(jié)果表明，CO<,2>激光可以在水下有效剝脫膀胱粘膜，具備與腔內(nèi)泌尿外科技術(shù)結(jié)合可行性。 4．結(jié)論： 經(jīng)國產(chǎn)多晶鍺空芯金屬紅外波導(dǎo)傳輸?shù)腃O<,2>激光在開放手術(shù)條件下能夠有效地剝脫膀胱粘膜，對膀胱肌肉組