CD133、BRAF在結直腸癌組織中的表達及其意義.pdf

1、【目的】：
　　1.評估組織芯片技術結合免疫組化技術在大規(guī)?；仡櫺詫嶒炛械目尚行浴?br>　　2.探討結直腸癌CD133表達與臨床病理指標及預后的關系。
　　3.探討結直腸癌BRAF蛋白表達、BRAF基因突變與臨床病理學指標及預后的關系。
　　【方法】：
　　1.第一部分:收集2004-2010年南京軍區(qū)福州總醫(yī)院手術切除經病理確診且臨床資料完整結直腸癌標本400例,構建組織芯片,采用組織芯片-免疫組化技術檢測結

2、直腸腸癌組織中BRAF/CD133蛋白的表達;并進行組織芯片與常規(guī)病理切片對比性研究。
　　2.第二部分:采用EliVisionTMplus免疫組化染色方法分別檢測CD133蛋白及BRAF蛋白在400例結直腸癌組織芯片標本中的表達,分析其與臨床病理指標的相關性。
　　3.第三部分:隨機選取126例BRAF免疫組化陽性和20例陰性病例,采用直接測序法檢測BRAF基因突變情況,分析其與臨床病理指標及患者預后的關系。
　　【

3、結果】：
　　一、免疫組化結果
　　1.陣列蠟塊完整,無開裂現(xiàn)象,組織蠟芯整齊有序,無移位。經顯微鏡觀察不存在無效組織,其著色的細胞為棕黃色,背景無著色。對于CD133和BRAF分別進行常規(guī)切片與組織芯片進行對比,發(fā)現(xiàn)兩者符合率高達93％,Kappa系數(shù)分別為0.714,0.700,說明兩者具有較高的符合率,無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　2.CD133的高表達與腫瘤分化程度、淋巴結轉移等有明顯相關性(P<0.05

4、),而與病人年齡、性別、腫瘤部位、大小、分化程度、浸潤深度均無明顯相關性。Kaplan—Meier生存分析法顯示,CD133低表達組3年生存率為93.6%,CD133高表達組3年生存率為76.8%,兩者具有明顯差異(P<0.O1)。
　　3.376例結直腸癌組織中有226例(60.1%)BRAF陽性,其中BRAF高表達陽性表達率為38.8%。其與患者分化程度、及淋巴結轉移具有相關性(P<0.05);而與年齡、腫瘤部位、大小、浸潤深

5、度不具有相關性(P>0.05);BRAF蛋白陽性患者生存率(82.6%)低于陰性患者(96.2%),但統(tǒng)計學上無顯著差異,其表達水平亦與患者生存期無明顯相關(P>0.O5);通過對CD133蛋白及BRAF蛋白進行Spearman相關性分析,發(fā)現(xiàn)兩者具有一定的相關性(r=0.505)。
　　二、基因突變檢測結果
　　結直腸癌中BRAF基因總突變率為8.9%(13/146),其突變與結腸癌的分期顯著相關,具有統(tǒng)計學意義(P<0.

6、05);BRAF基因突變與患者生存期具有相關性(P<0.05)。
　　【結論】：
　　1.組織微陣列技術在大規(guī)模多個樣本中的研究是可行的,其結果可信。
　　2.CD133在結腸直腸癌中表達顯著升高,并與腫瘤低分化、淋巴結轉移密切相關;且CD133可作為判斷結直腸癌患者預后的指標,其表達水平越高,預后越差。
　　3.BRAF強陽性表達與BRAF基因檢測的結果間存在一定的不一致性,IHC可作為BRAF狀態(tài)的初步篩查方