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文檔簡介
1、第一部分、膀胱尿路上皮癌CCR7的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系
目的:研究膀胱尿路上皮癌中CCR7蛋白的表達情況,探討CCR7蛋白表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性以及CCR7蛋白表達與腫瘤的分期、分級等臨床參數(shù)的關(guān)系。
方法:采用免疫組化染色的方法研究了57例膀胱尿路上皮癌的手術(shù)標本以及10例正常膀胱組織標本的CCR7蛋白表達,并進行半定量分析研究CCR7在膀胱腫瘤中的表達是否異常,同時采用統(tǒng)計學分析CCR7蛋白表達與淋巴
2、結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系,與腫瘤分期、分級等臨床參數(shù)之間的關(guān)系,并研究了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響因素。
結(jié)果:57例膀胱尿路上皮癌患者的CCR7蛋白表達陽性率為82.5%,明顯高于正常膀胱組織中CCR7蛋白的陽性率(20%);在腫瘤患者中,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CCR7蛋白的陽性率為95.5%,明顯高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組CCR7蛋白的陽性率(74.3%);CCR7蛋白在高分期腫瘤(T3-T4)中的陽性率顯著高于低分期腫瘤(T1-T2)(91.2%vs.69
3、.9%),在高分級腫瘤(G3)中的陽性率顯著高于低分期腫瘤(G1-G2)(87.5%vs.76.0%),CCR7在其他臨床參數(shù)中的比較無統(tǒng)計學意義;CCR7蛋白表達、腫瘤分期、腫瘤分級與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移相關(guān);僅CCR7是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨立影響因素。
結(jié)論:CCR7蛋白在膀胱尿路上皮癌中表達異常增加,與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān),是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨立影響因素。
第二部分、CCL21/CCR7對T24細胞生物學行為的影響
4、> 目的:研究CCL21/CCR7對T24細胞遷移、侵襲、增殖以及抗凋亡能力的影響。
方法:采用不同濃度的CCL21(0,50,100,200ng/mL)作用T24細胞,用Transwell實驗研究CCL21對T24細胞的遷移與侵襲能力;用MTT法研究了CCL21對T24細胞的增殖能力的影響,用FCM研究了CCL21對T24細胞抵抗ADM誘導(dǎo)的細胞凋亡,同時用western blot檢測了侵襲相關(guān)蛋白MMP-2與MM
5、P-9表達及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2與Bax的表達;實驗中使用CCR7抗體評估了CCL21作用于T24細胞產(chǎn)生的影響對CCR7的依賴性。
結(jié)果:CCL21作用于T24細胞能增強其遷移和侵襲能力,增強效果依賴于CCL21的濃度,CCL21能增加MMP-2與MMP-9的表達;CCL21還能促進T24細胞的增殖與抗凋亡能力,并能上調(diào)Bcl-2蛋白的表達,而抑制Bax蛋白的表達。上述CCL21對T24細胞的影響都依賴于CCR7受體的
6、活性。
結(jié)論:CCL21/CCR7增強了T24細胞的遷移與侵襲能力,促進了T24細胞的增殖與抗凋亡。
第三部分、CCR7與VEGF-C在膀胱尿路上皮癌表達的關(guān)系
目的:研究膀胱尿路上皮癌中CCR7蛋白與VEGF-C蛋白表達的相關(guān)性,并探討CCL21/CCR7軸對T24細胞VEGF-C分泌的影響。
方法:采用免疫組化染色的方法研究了57例膀胱尿路上皮癌的手術(shù)標本CCR7蛋白和VEGF
7、-C蛋白表達的相關(guān)性,采用RT-PCR研究了CCL21對T24細胞VEGF-C mRNA表達的影響,用Western blot研究了CCL21對T24細胞VEGF-C蛋白表達的影響,同時還研究了對RNA結(jié)合蛋白HuR的影響。
結(jié)果:57例膀胱尿路上皮癌患者的CCR7蛋白與VEGF-C蛋白的表達成正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.309;CCL21作用于T24細胞對VEGF-CmRNA的表達沒有明顯的影響(P=0.645)但對VEGF-
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