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文檔簡介
1、該文探討能否通過抑制TIMP-1的產生來阻斷或減少對MMPS的抑制作用,達到降解過多堆只的ECM的目的的可能性,為臨床肺間質纖維化的逆轉治療提供新的思路和方法.1、以博萊霉素誘導的腫間質纖維化大鼠為模型,探討MMP-2、9和TIMP-1在肺間質纖維化發(fā)病中的作用.2、用ECORI將人TIMP-ICDNA全長從重組載體PCR2.1-TIMP-1中切下,T<,4>DNA連接酶將TIMP-1CDNA雙向連接入PLXIND載體中,并轉化感受態(tài)細
2、菌H<,5>,將抗性克隆,用HINDIII和BSTX1雙酶切鑒定TIMP-1的插入方向,獲得PTS和PTAS,將PTS和PTAS包裝到PA317細胞,收到上請,用0.45um的濾器濾過,儲存?zhèn)溆?3、將表達timp-1正義和反義rna的逆轉錄病毒載體導入小鼠成纖維細胞nih3t3細胞系,并獲得穩(wěn)定表達正義和反義timp-1RNA細胞系,研究了正義和反義TIMP-1核酸對成纖維細胞生物學功能的影響.總之,該研究發(fā)現(xiàn)1、MMP-2、MMP-
3、9、TIMP-1在中均表達,表明MMP-2、MMP-9、TIMP-1參與與正常肺組織ECM代謝.2、在肺間質纖維化模型大鼠MMP-2MRNA早期表達增高、后期表達下降,TIMP-1MRNA在全過程持續(xù)高表達.提示細胞外基質積累可能與MMP-2后期表達降低以及TIMP-1持續(xù)高表達抑制MMP-2或其它MMPS的活性有關.3、反義TIMP-1核酸對MMPS和細胞外基質的表達并未產生直接的影響,但能抑制NIH3T3細胞的增殖及內源TIMP-1
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