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1、目的:研究川芎嗪對(duì)大鼠中度急性脊髓損傷模型的脊髓功能和脊髓細(xì)胞凋亡的影響。 方法:取健康成年大鼠96只,體重225-275g之間,隨機(jī)分配成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,參照Allen重物落體打擊法<'[1]>制作大鼠脊髓損傷模型96個(gè)。實(shí)驗(yàn)組大鼠傷后30分鐘開(kāi)始給予川芎嗪注射液腹膜腔內(nèi)注射40mg/kg,每8小時(shí)給藥一次,直到被處死;存活時(shí)間長(zhǎng)于5天者用藥5天。對(duì)照組給予等體積生理鹽水腹膜腔注射,給藥次數(shù)和總量與實(shí)驗(yàn)組類(lèi)似。在SCI后第8,
2、24小時(shí)和第3,7,14,21天共6個(gè)時(shí)間點(diǎn)每組隨機(jī)選擇8只大鼠處死取標(biāo)本,每只大鼠取標(biāo)本3個(gè),即損傷部位脊髓0.3cm長(zhǎng)度,以及頭尾側(cè)鄰近的未損傷脊髓O.3cm長(zhǎng)度各一段。每個(gè)標(biāo)本在縱軸中心部位連續(xù)切片2張分別做TUNEL法(缺口原位末端標(biāo)記法)標(biāo)記染色和Hoechst染色來(lái)計(jì)數(shù)200倍鏡下觀(guān)察到的凋亡細(xì)胞數(shù)量。SPSSll.5統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)比兩組動(dòng)物的脊髓標(biāo)本在6個(gè)時(shí)間點(diǎn)的凋亡細(xì)胞的平均數(shù)量是否有顯著性差異。此外,兩組第7、14、2
3、1天處死的每只動(dòng)物處死前作改良Rivlin斜板法和改良 Tarlov評(píng)分以評(píng)測(cè)脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能,統(tǒng)計(jì)分析兩組間是否有差異。 結(jié)果:SCI后第8,24小時(shí)均可觀(guān)察到調(diào)亡的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞,損傷中心及其的頭尾側(cè)標(biāo)本均多見(jiàn)。第3天凋亡細(xì)胞已經(jīng)明顯減少,第7,14,2l天時(shí)間點(diǎn)還有少量凋亡細(xì)胞分布。前四個(gè)時(shí)間點(diǎn)川芎嗪實(shí)驗(yàn)組的凋亡細(xì)胞數(shù)量較生理鹽水對(duì)照組明顯少,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。第14,21天處死的大鼠用改良Rivlin斜板法和改良Talrl
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