反義磷脂酶Dγ基因轉(zhuǎn)化白三葉草的研究.pdf

1、白三葉草(Trifoliumrepens)是重要的豆科牧草之一。它既是重要的飼料作物，又在土壤改良、水土保持、以及生態(tài)環(huán)境保護(hù)方面發(fā)揮著積極作用。本研究課題以白三葉草為實(shí)驗(yàn)材料，以它的芽為外植體進(jìn)行再生培養(yǎng)，系統(tǒng)地研究了激素濃度、光照條件、外植體密度、培養(yǎng)容器等諸多因素對芽再生芽的影響，建立了白三葉草的芽高頻再生體系。在此基礎(chǔ)上，用攜帶反義磷脂酶D γ基因(PLD γ)的根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化自三葉草芽外植體，通過對轉(zhuǎn)化方法和條件的探索，建

2、立了白三葉草的遺傳轉(zhuǎn)化體系。白三葉草遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立對于利用基因工程對白三葉草進(jìn)行品種改良起著重要的作用。研究結(jié)果表明，不同的激素濃度配比對白三葉草的生長、芽分化、生根等方面有重要影響。通過不同激素濃度配比的實(shí)驗(yàn)，確定了最佳壯苗培養(yǎng)基(MS+0.15mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.1mg/LKT+20mg/LAd)葉片再生培養(yǎng)基(MS+0.5mg/6-BA+0.1mg/LNAA)、和生根培養(yǎng)基(1/2 MS+0.1mg/L