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文檔簡介
1、本課題采用高效液相-二極管陣列檢測-飛行時間質(zhì)譜(HPLC-DAD-TOF-MS)色譜聯(lián)用技術(shù),對六味地黃丸各種劑型進行了定性定量研究。首先通過建立六味地黃丸化學成分數(shù)據(jù)庫,結(jié)合對照品比對和HPLC-IT/MS結(jié)構(gòu)解析,對六味地黃丸的指紋圖譜成分進行了鑒別,得到了明晰化的六味地黃丸指紋圖譜,能夠代表六味地黃丸中的色譜信息,為進一步譜效相關(guān)性的研究建立基礎(chǔ)。同時對六味地黃丸中6個指標性成分-沒食子酸、5-羥甲基糠醛、馬錢苷、獐牙菜苷、芍藥
2、苷和丹皮酚進行了含量測定,對不同劑型和不同廠家中主要成分的差異進行研究,結(jié)果表明不同劑型和不同廠家之間存在含量差異,而同一廠家的含量具有一致性。
結(jié)合建立的六味地黃丸色譜分析方法,采用近紅外光譜技術(shù),將近紅外在線檢測集成到中藥自動化生產(chǎn)線的多個環(huán)節(jié)中,建立根據(jù)中藥內(nèi)在質(zhì)量進行自動控制的中藥生產(chǎn)質(zhì)量控制新模式,研究建立了六味地黃丸提取過程的近紅外光譜在線分析方法,建立了六味地黃丸提取過程的4個指標成分丹皮酚、芍藥苷、馬前素和
3、沒食子酸的光譜校正模型。用此模型分析六味地黃丸提取過程,得到了比較滿意的結(jié)果。研究表明,近紅外光譜技術(shù)可用于六味地黃丸提取過程的在線分析及預測。
本研究通過建立經(jīng)典的中醫(yī)模型-腎陰虛模型,采用地塞米松造腎陰虛模型,研究對下丘腦-垂體-性腺(HPG)軸平衡失調(diào)的調(diào)節(jié)作用,證實六味地黃丸能顯著地拮抗地塞米松對小鼠免疫功能的抑制。研究摘除雙側(cè)卵巢后,雌性大鼠下丘腦-垂體-卵巢(HPO)軸各環(huán)節(jié)激素水平的變化,研究了六味地黃丸不同
4、劑型對動物內(nèi)分泌特別是生殖激素的調(diào)節(jié)具有一定療效。
采用模式識別對建立的多個廠家不同劑型的六味地黃丸的指紋圖譜進行了分析,主要運用主成分分析(PCA)、聚類分析(HCA)等無監(jiān)督的模式識別方法對六味地黃丸進行分類研究,通過應(yīng)用偏最小二乘法-判別分析(PLS-DA)進行不同劑型和廠家的質(zhì)量評價,通過PLS-DA建立合理的模型后,發(fā)現(xiàn)5-羥甲基糠醛、莫諾苷、馬錢苷、芍藥苷、沒食子酸等成分對蜜丸和濃縮丸的分類具有關(guān)鍵作用,故可用
5、作六味地黃丸制劑的化學標記物,可作為質(zhì)量控制的指標性成分和進一步研究的方向。
綜合色譜數(shù)據(jù)信息和藥效評價信息,采用LARS(LeastAngleRegressionAlgorithm)回歸算法進行了譜效學的初步相關(guān)研究,對11個批次六味地黃丸指紋圖譜和相關(guān)免疫及內(nèi)分泌藥效數(shù)據(jù)進行分析評價,采用該算法在指紋譜中尋找與藥效相關(guān)的成分,發(fā)現(xiàn)了多個具有一定價值的化學成分,本研究可為建立中藥指紋圖譜與藥效學相關(guān)的復方中藥質(zhì)量控制模式
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