水稻9311對于水稻細菌性條斑病侵染應答的差異蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、水稻細菌性條斑病是由Xanthomonas oryzae pv. oryzicola引起的,在熱帶、亞熱帶稻區(qū)廣泛發(fā)生的細菌病害,也是目前威脅我國南方稻區(qū)水稻生產(chǎn)的重要病害之一,可以引起5%-40%的產(chǎn)量損失。本研究以對水稻細菌性條斑病極感病的水稻品種-9311為研究對象。通過雙向電泳聯(lián)用質(zhì)譜技術,研究了9311在水稻細菌性條斑病病菌侵染后4個不同時間段(12h、48h、5d、10d)的葉片全蛋白2-DE圖譜的變化,并對差異表達的蛋白質(zhì)

2、點進行MALDI-TOF/MS分析。2-DE圖譜分析結果表明：在病原菌侵染9311后不同時期,共檢測到164個差異蛋白出現(xiàn),其中表達量上升的23個；表達量下降的16個；誘導出現(xiàn)的蛋白71個；抑制表達的蛋白54個。將164個差異蛋白點經(jīng)MALDI-TOF/MS分析,得到其中106個蛋白的肽質(zhì)量指紋圖譜。通過MASCOT數(shù)據(jù)庫比對,鑒定出水稻細菌性條斑病病菌侵染誘導差異表達蛋白86個。對這86個差異表達蛋白的同源性序列比對以及功能分析,并著

3、重研究了其中的R和PR類蛋白,得到了其中NBS-LRR類蛋白質(zhì)的同源進化樹,以及NBS-LRR類蛋白和RLK/激酶類蛋白的保守區(qū)/功能區(qū)的分析結果。并根據(jù)蛋白序列分析結果,設計PCR引物,經(jīng)RT-PCR,從水稻cDNA中,獲得水稻RLK/激酶類基因片斷5個,NBS-LRR類基因片斷2個,PR-10基因家族成員基因片斷1個。其中一個編號13-3-4的NBS-LRR類基因,在基因庫中,與現(xiàn)有的同類基因最高的同源性為91%。經(jīng)Northern