杠柳毒素NW的分離、殺蟲活性及其作用機(jī)理初步研究.pdf

1、本論文在生物活性追蹤法指導(dǎo)下，對(duì)杠柳殺蟲活性成分做了進(jìn)一步分離，并且通過癥狀學(xué)、組織學(xué)觀察及生理生化研究等初步探討其殺蟲主要成分作用機(jī)理，為進(jìn)一步研究和開發(fā)杠柳這一寶貴殺蟲植物資源提供依據(jù)。主要結(jié)果如下： 1.分別對(duì)杠柳根皮的石油醚、乙酸乙酯、甲醇提取物進(jìn)行了生物測定。結(jié)果表明，甲醇提取物對(duì)粘蟲的胃毒活性最高，在50 mg-mL-1的濃度下，其對(duì)粘蟲48h的校正死亡率達(dá)到86.89％。 2.采用常壓柱層析、HPLC制備等

2、方法，在生物活性追蹤指引下，從杠柳甲醇提取液中分離出三個(gè)化合物Z01、Z02、Z03，經(jīng)波譜技術(shù)鑒定Z01、Z02、Z03分別為杠柳新苷A、杠柳毒素NW和麥角甾醇，其中杠柳毒素NW為一未見文獻(xiàn)報(bào)道的新化合物。 3.杠柳毒素Nw活性明顯高于之前報(bào)道過的杠柳新苷A，其對(duì)三齡的小菜蛾、粘蟲和五齡的菜青蟲均有較強(qiáng)的胃毒活性，處理24h的致死中濃(LC50)分別是866.17mg·L-1、927.92 mg·L-1、1107.08 mg·

3、L-1；對(duì)上述供試?yán)ハx均無明顯的觸殺活性。此外，杠柳毒素NW對(duì)棉蚜、棉紅蜘蛛及衛(wèi)生害蟲家蠅三齡幼蟲和淡色庫蚊三齡幼蟲均有很好的毒殺活性，處理24h的LC50分別為1743.17 mg·L-1、2178.49 mg·L-1、714.94 mg·L-1、653.29 mg·L-1。 4.通過癥狀學(xué)、組織學(xué)及消化酶等生理生化指標(biāo)的測定，表明經(jīng)杠柳毒素NW處理后4h，淀粉酶的比活力與同期對(duì)照相比明顯降低，并且隨著時(shí)間的延長，淀粉酶被抑制

4、的幅度增加；然而處理的蛋白酶比活力與同期對(duì)照相比均有所提高，且隨著時(shí)間的延長，蛋白酶被激活的幅度增加。光鏡下觀察到粘蟲幼蟲中腸杯狀細(xì)胞與柱狀細(xì)胞微絨毛層遭到破壞，這樣直接破壞了中腸腸壁的屏障作用，使藥物更容易進(jìn)入血淋巴，繼而作用其它靶標(biāo)。說明杠柳毒素NW可能是一種消化道破壞劑，直接破壞了粘蟲中腸細(xì)胞，致使血淋巴穿過腸壁細(xì)胞進(jìn)入中腸，導(dǎo)致中腸腫脹，隨著進(jìn)入中腸的血液增多，腸壁破裂，中腸解體，試蟲死亡。進(jìn)一步的透射電鏡觀察表明，藥劑處理的粘