24512.昆蟲病原線蟲共生菌菌株09flyb1的分離鑒定及其殺蟲毒素蛋白的分離純化與活性研究

1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文昆蟲病原線蟲共生菌菌株09FLYB1的分離鑒定及其殺蟲毒素蛋白的分離純化與活性研究姓名：房云申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：動物學(xué)指導(dǎo)教師：賴仞；張克云201012昆蟲病原線蟲共生菌菌株09FLYBI的分離鑒定及其殺蟲毒素蛋白的分離純化與活性研究528％，存活幼蟲的體重抑制率為753％；09FLYBlGII對昆蟲的校正死亡率為115％，存活幼蟲的體重抑制率為256％。該結(jié)果顯示09FLYBlGI為胃毒力活性峰。檢測血腔毒

2、力時，向每頭大蠟螟體內(nèi)注射10pL濃度為2pgpL1殺蟲蛋白凍干粉溶解液，09FLYBlGI的校正死亡率為947％，09FLYBlGII的校正死亡率為25％，表明09FLYBlGI為血腔毒力活性峰。將09FLYBlGI過DEAESepharoseFF陰離子交換柱，得到1個峰，標(biāo)記為09FLYBlD—I。檢測胃毒活力時，按照lg人工飼料中添加100昭凍干粉的比例添加09FLYBlDI，09FLYBlDI校正死亡率為536％，體重抑制率為7

3、82％。檢測血腔毒力時，向每頭大蠟螟體內(nèi)注射lOpL濃度為2pgpL1殺蟲蛋白凍干粉溶解液，09FLYBlDI校正死亡率為100％。非還原性SDSPAGE圖譜和還原性SDSPAGE顯示，殺蟲蛋白經(jīng)過分子篩和離子柱分離純化后，在分子量50kDa附近有一明顯蛋白條帶，表明該蛋白只有一個亞基。根據(jù)非還原性SDSPAGE圖譜計算該殺蟲蛋白的相對分子質(zhì)量約為5324kDa標(biāo)記為09FLYBlP53。進一步測定殺蟲蛋白09FLYBlP53對大蠟螟幼