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1、分類號:Q78學(xué)校單位代碼:10446碩士學(xué)位論文論文題目:論文題目:泰山蟲草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究泰山蟲草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究泰山蟲草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究泰山蟲草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究研究生姓名:趙品蒼學(xué)科、專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:分子生物學(xué)導(dǎo)師姓名、職稱:曲志才教授論文完成時(shí)間:2012年4月曲阜師范大學(xué)2009級研究生畢業(yè)論文I摘要蟲草屬隸屬麥角菌科(Clavicipitaceae)、肉座菌目(Hypocreales)、核
2、菌綱(Pyrenomucetes)、子囊菌門(omycota),廣布于全世界。最新的分類學(xué)將其分為三個(gè)科蟲草科(Cdycipitaceae)、麥角菌科(Clavicipitaceae)、蛇形蟲草科(Ophiocdycipitaceae)四個(gè)屬(Cdyceps、Metacdyceps、Elaphocdyceps、Ophiocdyceps)。本文主要以野生泰山蟲草的子實(shí)體為材料,以Tef1α、βtub、nrSSU、nrLSU基因的部分序列和
3、rDNAITS序列為分子標(biāo)記,運(yùn)用同源性分析、系統(tǒng)進(jìn)化分析、遺傳距離分析等方法探討泰山蟲草的分類地位以及與其它蟲草的親緣關(guān)系,并對功能基因進(jìn)行F分析,以期為泰山蟲草的開發(fā)與應(yīng)用提供相關(guān)的理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:1.以泰山蟲草基因組DNA為模板,用蟲草通用引物和一條新設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)增出五個(gè)目的片段,經(jīng)回收、克隆、測序后提交到NCBI數(shù)據(jù)庫,得到的登錄號分別為:βtub(JN547406)、Tef1α(JN547405)、nrSSUITSnr
4、LSU(JN411084),2012年10月以后釋放。2.以Tef1α、βtub、nrSSU、nrLSU、rDNAITS序列為分子標(biāo)記,分別進(jìn)行同源性分析,結(jié)果表明泰山蟲草、九州蟲草、蛹蟲草三者之間相似性在99%以上,據(jù)此難以區(qū)分哪兩者之間的親緣關(guān)系更近;單基因系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果也顯示這三種蟲草始終聚在一起。提示了這三者之間在分類地位上的一致性,應(yīng)同歸為蟲草科。3.以Tef1α、βtub、nrSSU、nrLSU為分子標(biāo)記進(jìn)行的遺傳距離分析
5、結(jié)果顯示泰山蟲草和九州蟲草的親緣關(guān)系更近,兩者之間的遺傳距離和標(biāo)準(zhǔn)誤差均為0.000;nrSSUnrLSUTef1α三基因綜合數(shù)據(jù)的系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果表明泰山蟲草和九州蟲草始終聚在一起,然后與蛹蟲草聚在一起。結(jié)合同源性分析結(jié)果,可以推斷泰山蟲草和九州蟲草為同物異名。4.運(yùn)用光學(xué)顯微鏡及石蠟切片技術(shù)對泰山蟲草子實(shí)體的顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,并對其表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行電子顯微鏡掃描觀察。結(jié)果顯示,供試材料子囊殼的排列方式和包埋情況與文獻(xiàn)所描述的九州蟲草和蛹
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