油菜素內(nèi)酯對棉花纖維分化發(fā)育的影響及其調(diào)控基因bzr1的轉(zhuǎn)化.pdf

1、油菜素內(nèi)酯是一種廣泛存在于植物體內(nèi)的激素,它對植物的生長發(fā)育具有十分重要的作用,其主要的生理功能是:促進植物細胞的分裂、分化,促進植物莖的伸長,促進花粉管的分化,增強植物的抗逆性,參與光形態(tài)建成.該實驗通過棉花胚珠體外培養(yǎng)的方法探討了油菜素內(nèi)酯對棉花纖維細胞分化發(fā)育的影響,并利用基因槍的方法把bzr1-CFP融合基因轉(zhuǎn)入棉花胚珠,探討了報告基因CFP在棉花纖維研究中的應用.所得實驗結(jié)果主要為:(1)在BT培養(yǎng)基中加入不同濃度的油菜素內(nèi)酯

2、,分別為0、0.005、0.05、0.5、5、50μM,研究發(fā)現(xiàn)當油菜素內(nèi)酯的濃度在0與0.5μM之間時,棉花纖維的長度對濃度的升高而增長,隨后逐漸變短,當油菜素內(nèi)酯的濃度為50μM時棉花胚珠不能長出纖維.通過生物統(tǒng)計的方法知,在此濃度下生長的棉花纖維的長度與對照相比為顯著差異,可見當油菜素內(nèi)酯的濃度為0.5μM時,能有效的促進棉花纖維的伸長,在上述六種BR濃度的BT培養(yǎng)基中分別培養(yǎng)花前一天和花后一天的棉花胚珠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)花后一天的棉花胚

3、珠可以正常的分化發(fā)育出棉花纖維,而花前一天的棉花胚珠在所有濃度的培養(yǎng)基中均不能分化發(fā)育出纖維.通過掃描電鏡觀察可知,花前一天的棉花胚珠表皮細胞還沒有完全分化成纖維細胞,而花后一天的胚珠表皮細胞已分化出明顯的纖維突起,雖然油菜素內(nèi)酯能夠有效地促進棉花纖維的伸長,但是當棉花纖維細胞尚未分化完全時,它不能促進棉花纖維細胞的分化.(2)在BT培養(yǎng)基中同時加入0.5μM的油菜素內(nèi)酯和5μM的赤霉素,培養(yǎng)花后一天的棉花胚珠,另設三個對照,分別為:加

4、有0.5μM的油菜素內(nèi)酯、5μM的赤霉和不加任何激素的BT培養(yǎng)基,發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中同時加入兩種激素時,棉花纖維的長度比其它三個對照中生長的棉花纖維的長度均長,可見油菜素內(nèi)酯與赤霉素在棉花纖維生長的過程中是相互促進的作用,其共同作用能更有效的促進棉花纖維的伸長.(3)利用基因槍的轉(zhuǎn)化方法把CFP與油菜素內(nèi)酯的調(diào)控基因bzr1的融合基因轉(zhuǎn)入了棉花胚珠,探索CFP報告基因在棉花纖維中的應用.7天時可以檢測到報告基因CFP表達的蛋白質(zhì),而在9天時