茄青枯假單胞菌花生寄主特異性毒性基因的功能鑒定.pdf

1、我們采用互補(bǔ)和hsvP基因同屬一個(gè)操縱元的其下游基因ORF2的方法構(gòu)建了T2015的只有hsvP基因突變的突變體T21 35/R.T2015、T2014、T6418、T2135/R等菌株對(duì)花生等不同作物的植株致病性試驗(yàn)和煙草上過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)表明hsvP基因除與病菌在花生上致病有關(guān)外,還與病菌在馬鈴薯等作物上致病有關(guān),而與病菌在非寄主植物上引起過(guò)敏反應(yīng)無(wú)關(guān).T641 8的菌落形態(tài)明顯大于T201 4,而T21 35/R的菌落與T2015相比

2、則顯著變小,這暗示了hsvP基因與菌落大小有關(guān).hsvP基因序列分析表明它編碼的產(chǎn)物與大腸桿菌的rfaL基因的產(chǎn)物脂質(zhì)A核心區(qū)-0-抗原連接酶有23％一致性和44%相似性.病菌的LPS電泳檢測(cè)表明T2135/R的LPS缺少0-抗原,證實(shí)hsvP基因在LPS合成中起脂質(zhì)A核心區(qū)-0-抗原連接酶作用.盡管T201 5/R仍保留一定的毒力,但和T201 5相比,其在花生植株體內(nèi)的數(shù)量顯著減少,而T641 8的數(shù)量顯著多于T201 4的數(shù)量.這

3、可能說(shuō)明在植株體內(nèi)完整的LPS能夠更好地保護(hù)病菌免受植物的抗菌物質(zhì)的傷害,或者完整的LPS作為信號(hào)分子能夠部分抑制植物的防御反應(yīng).對(duì)T201 4的和T201 5 hsvP基因同源的序列的測(cè)序分析表明,T201 4的同源基因和T201 5的hsvP基因相比在1 033-1 036 bp處缺少4個(gè)堿基,產(chǎn)生一個(gè)編碼框內(nèi)的終止密碼子(in-frame stop codon)使翻譯提前終止.LPS電泳檢測(cè)表明帶有T2015 hsvP基因的T20