27058.魚腥藻pcc7120裂合酶相關(guān)基因的啟動子及表達(dá)調(diào)控的研究_第1頁
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文檔簡介

1、中南民族大學(xué)碩士學(xué)位論文魚腥藻PCC7120裂合酶相關(guān)基因的啟動子及表達(dá)調(diào)控的研究姓名：劉麗申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳思禮20100601魚腥藻PCC7120裂合酶相關(guān)基因的啟動子及表達(dá)調(diào)控的研究IIAbstractLyaseplaysanimptantroleintheprosessofmostcyanobacteriaphycobiliproteinssynthesis.alr0617encodedCp

2、cS1all5339encodedCpcT1havebeenshowntohavelyaseactivity.GenescpcS2(all5292)cpcT2(alr0647)whicharehighhomologouswithcpcS1cpcT1wereconfirmedwithoutcatalyticactivity.Tnadditionthesetwogenesonlyexpressinthenitrogendificiencyc

3、onditionsinthenmalcasestheydonotexpress.Constructionofalr0617△deletionmutantcanchoosegeneknockoutapproach.Throughmolecularbiologyapproachalr0617itsupstreamdownstreamwereamplifiedbyPCR.alr0617wasdreplacedbyspectinomycinwa

4、slinkedtoanothervectpRL271whichcontainingsacBgene.ThenthevectwastobetransfmedtotheAnabaenaPCC7120wildtypestrainbyconjugation.Resistancesucrosewereusedfscreeningtransfmants.Sincecyanobacteriacontainmultiplecopiesinthegeno

5、methestrainsobtainedaresingleexchangemutants.Comparedwithwildtypecellsalr0617△havethesameabilityagainstthepressureofnitrogendeficiencybutquitemesensitivetosucrose.ThispaperalsoresearchedoncpcS2(all5292)cpcT2(alr0647)prom

6、oterfragments.Bychoosing5upstreamsdifferentlenthsofcpcS2(all5292)cpcT2(alr0647)fusingwithgenegfpinvitrothentransferringintocyanobacteriacellbyconjugation.ThroughtheobservationofGFPfluescencetoidentifythetranionalactivity

7、ofpromoterfragments.Theresultsshowedthat:inthenmalmediumBG11nitrogendeficiencymediumBG1101100bpfragmentwhichisupstreamofcpcS2havenotpromoteractivity2000bpfragmenthaveweakpromoteractivity1300bp2600bpfragmentsofthecpcT2hav

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