旱冬瓜遺傳多樣性的RAPD分析.pdf

1、遺傳多樣性是林木遺傳育種的物質(zhì)基礎(chǔ).但是,傳統(tǒng)林木遺傳育種主要考慮遺傳增益,而忽視了林木遺傳多樣性問題,導(dǎo)致了一些嚴(yán)重問題的出現(xiàn).現(xiàn)在,林木育種學(xué)家已經(jīng)意識(shí)到,長(zhǎng)期育種應(yīng)以維持育種群體遺傳變異為主要目的,以物種生物學(xué)、群體遺傳學(xué)和居群生態(tài)學(xué)為理論基礎(chǔ).旱冬瓜(Alnus nepalensis D.Don)是云南省重要的造林、用材樹種,但是林分退化相當(dāng)嚴(yán)重,影響了該樹種的利用價(jià)值,因此對(duì)其進(jìn)行遺傳改良非常必要.該論文運(yùn)用RAPD標(biāo)記技術(shù)對(duì)

2、旱冬瓜種群遺傳多樣性進(jìn)行研究,希望可以為該樹種的遺傳改良策略定制提供科學(xué)的依據(jù).主要結(jié)論如下:(1)利用CTAB法成功抽提出符合實(shí)驗(yàn)要求的DNA樣品.(2)建立了旱冬瓜RAPD分析技術(shù)體系:25ul反應(yīng)體系中,含1×Buffer,1.9mM/LMgCl2,0.3pM隨機(jī)引物,0.25mM/L DNTPs,1.25U Taq,20ng DNA摸板.反應(yīng)程序?yàn)?94℃預(yù)變性4min,然后執(zhí)行40個(gè)擴(kuò)增循環(huán),每個(gè)循環(huán)中,94℃變性40s,36

3、℃退火40s,72℃延伸1min.最后72℃延伸10min.(3)采用16個(gè)引物對(duì)分布于云南省的4個(gè)旱冬瓜群體共60個(gè)個(gè)體進(jìn)行了RAPD擴(kuò)增和分析,得出物種水平的多態(tài)條帶百分率(PPB)為52.94％,Nei的基因多樣度(Ht)為0.1268.分子方差分析(AMOVA)表明,在總遺傳變異中,群體內(nèi)遺傳變異占96.91%;POPGENE給出的基因分化系數(shù)(Gst)為0.0751;物種的遺傳變異主要存在于群體內(nèi).(4)旱冬瓜屬風(fēng)媒植物,借助