狼尾草屬牧草遺傳多樣性的RAPD和ISSR分析.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、以福州、建陽兩個(gè)地區(qū)的45份狼尾草屬牧草的幼嫩葉片為材料,研究了RAPD-PCR和ISSR-PCR反應(yīng)條件;并應(yīng)用RAPD和ISSR分子標(biāo)記對(duì)45份狼尾草屬牧草遺傳多態(tài)性、親緣關(guān)系等進(jìn)行分析,結(jié)果表明:
　　 1、單因素結(jié)合正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化得到狼尾草屬牧草優(yōu)化的RAPD-PCR和ISSR反應(yīng)體系。RAPD-PCR優(yōu)化的最終體系為:總體積為20μL,反應(yīng)體系中含有1.5μL(25mmol/1)Mg2+、0.4μL dNTPs(10

2、mM)、1.2μL primer(10pM)、0.4μLTaq DNA Polymerase(5U/μL)、2.0gL10xPCR Buffer、2.0μL DNA,加ddH2O補(bǔ)足到20μL;優(yōu)化的ISSR-PCR體系為:總體積為25μL,含有1.5μL Mg2+(25mM)、0.3μL dNTPs(10mM)、1.5μL primer(10pM)、0.4μL Taq DNA Polymerase(5U/μL)、2.5μL10×PCR

3、 Buffer、2.0μL DNA,ddH2O補(bǔ)足到25μL。
　　 2.分別從100條RAPD引物和100條ISSR引物中篩選出8條RAPD引物和9條ISSR引物用于RAPD和ISSR分析。8條RAPD引物共檢測(cè)到70個(gè)位點(diǎn),其中多態(tài)位點(diǎn)占88.57％,Nei's基因多樣度為0.3080,Shannon信息指數(shù)為0.5334;9條ISSR引物共檢測(cè)到83個(gè)位點(diǎn),其中多態(tài)位點(diǎn)占92.77％,Nei's基因多樣度為0.2832,S

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